多光子レーザー走査顕微鏡（MLSM）の利点と欠点
多光子レーザー走査顕微鏡法は、レーザー走査顕微鏡技術に基づく実験方法であり、3次元観察のためのより優れた光学セクショニング機能を提供します。多光子蛍光励起法は、長波長の赤色光または近赤外光を使用して標本の高解像度の蛍光画像を収集し、生きた標本へのダメージを最小限に抑えます。したがって、生細胞イメージング、特に脳切片、胚などの厚い生体組織に適しています。臓器全体、さらには全身のイメージング研究。
利点は次のとおりです。
1. 赤色光または赤外線を使用して励起すると、光の散乱が小さくなります（小さな粒子の散乱は波長の 4 乗に反比例します）。
2. ピンホールが不要になり、イメージング断面からより多くの散乱光子を収集できます。
3. ピンホールは焦点が合っていない領域または焦点領域から放出された散乱光子を区別することができず、深層における多光子イメージングの信号対雑音比は良好です。
4. 単一光子励起に使用される紫外線または可視光は、ビームが焦点面に到達する前にサンプルによって容易に吸収され減衰するため、深層を励起することが困難です。
5. 生物顕微鏡観察では、生物自体の活動状態を損なわず、水、イオン濃度、酸素、栄養素の流れを維持することを第一に考えます。光観察の場合、熱と光子エネルギーの両方が、細胞が損傷しない照射量と光エネルギー内に収まる必要があります。
6. 多光子顕微鏡にも多くの利点があります。たとえば、3次元解像度、深度浸透、散乱効率、背景光、信号対雑音比、制御などの点で、以前のレーザー顕微鏡にはなかった、または匹敵できなかった超越的な特性があります。
多光子共焦点レーザー走査顕微鏡は、さまざまな研究・応用分野に拡大され、サンプルを自然状態で3次元的に非破壊観察することができ、システムの解像度と信号対雑音比を向上させることができます。多光子励起材料の特性変化を利用することで、3次元高さデータ保存や任意の方向への3次元微細加工も実現でき、高い応用価値を持っています。多光子共焦点顕微鏡に関連する機械、材料、レーザー技術などのさらなる発展に伴い、より多くの光子共焦点レーザー走査顕微鏡がより大きな発展と幅広い応用を受けると考えられています。
デメリットは次のとおりです。
1. 蛍光のみを撮影できます。
2. サンプルに色素などの励起光を吸収する発色団が含まれている場合、サンプルは熱によって損傷を受ける可能性があります。
3. 解像度が若干低下します。共焦点穴を同時に使用することで改善できますが、信号損失が発生します。
4. 高価な超高速レーザーによって制限されるため、多光子走査顕微鏡のコストは比較的高くなります。
