蛍光顕微鏡と通常の光学顕微鏡の違いと特徴
蛍光顕微鏡は、通常の光学顕微鏡とは異なり、通常の光源の照明を通じて標本を観察するのではなく、特定の波長の光（通常は紫外線、青紫色光）を使用して、顕微鏡下の標本内の蛍光物質を励起し、蛍光を発させます。したがって、蛍光顕微鏡の光源は直接照明として機能するのではなく、標本の内部の蛍光物質を励起するエネルギー源として機能します。標本を観察できるのは、光源の照明によるものではなく、標本内の蛍光物質が励起光エネルギーを吸収することによって生じる蛍光現象によるものです。蛍光顕微鏡の主な特徴は、その光源が特定の波長範囲で大量の励起光を供給できるため、検査対象の標本内の蛍光物質が必要な励起光強度を得ることができることです。同時に、蛍光顕微鏡には対応するフィルターシステムが必要です。蛍光顕微鏡は、高度な蛍光組織化学に不可欠なツールです。超高圧光源、フィルターシステム（励起フィルタープレートと抑制フィルタープレートを含む）、光学系、撮影システムで構成されています。 特定の波長の光を使用して標本を励起し、蛍光を発します。
1. 蛍光を励起する方法：光の波長範囲に応じて、UV励起法（紫外線照明法を使用）とBV励起法（青紫色光を使用）の2種類に分けられます。UV励起法は、励起に400nm未満の近紫外線を使用します。この方法では可視励起光がないため、観察される蛍光は染料の固有の蛍光を示し、標本上の特定の蛍光と背景組織の自己蛍光を簡単に区別できます。
2. BV励起法：紫外線から404nmと434nmを中心とした青色光への励起。この方法では青色光を使用して標本を照射するため、蛍光観察システムのカットオフフィルターは、青色光を完全に遮断し、必要な緑色と黄色の蛍光を完全に通過できるフィルターを使用する必要があります。蛍光抗体法で使用される蛍光染料。励起光の最大吸収波長と蛍光の最大発光波長は比較的近いため、BV励起法で使用するフィルターは、シャープなカットオフフィルターを使用する必要があります。この方法では、青色光を励起光として使用できるため、蛍光色素の吸収効率が高く、より明るい画像が得られます。欠点は、500nm未満の蛍光は見えず、500nmを超える蛍光は画像全体が黄色に見えることです。蛍光抗体法では、蛍光染料の特異性は主にその固有の色によって判断されます。したがって、微妙な特異性を議論する場合、BV励起法の上記の欠点が大きな影響を与えることがよくあります。
