蛍光顕微鏡の基本操作
ａ． 部屋の照明を消し、顕微鏡の水銀ランプを点灯します。
b. サンプルによって標識されたフルオレセインに応じて、対応するフィルターを選択します。
c. サンプルを配置し、適切な視野を見つけます。
d. 写真を撮る必要がある場合は、カラーフィルムがカメラに取り付けられていることを確認してください。
e. Selfie デバイスの電源を入れ、マニュアルギアを選択します。通常、撮影速度は 0.5-10 秒以内です。
f. 使用後はすべての電源を切り、使用記録を残してください。 の
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3. 蛍光画像の記録方法
蛍光顕微鏡で観察される蛍光画像は、形態的特徴と蛍光の色や明るさを併せ持っています。 結果を判断する場合には、両者を組み合わせて総合的に判断する必要があります。 結果は作業者の目視による主観的な指標に基づいて記録されます。 一般的な定性的観察としては、基本的に信頼できます。 技術や科学の発展に伴い、細胞分光光度計や画像解析装置など、判定結果を記録する客観的な指標が多かれ少なかれ利用されるようになりました。 ただし、これらの機器によって記録された結果には、主観的な判断も組み合わされる必要があります。 の
蛍光画像を記録するには蛍光顕微鏡写真が不可欠です。 蛍光は退色しやすく弱くなりやすいため、結果をリアルタイムに記録する必要があります。 基本的には通常の顕微鏡写真法と同じです。 高感度の感光フィルムを使用するだけです。 FITCマーカーなどの蛍光消光には紫外線が強い影響を与えるため、紫外線を30秒照射すると蛍光輝度が50％減少します。 したがって、露光速度が遅すぎると蛍光画像を撮影できなくなります。 一般的な研究用蛍光顕微鏡には、半自動または全自動の顕微鏡写真システムデバイスが搭載されています。 の
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4. 蛍光顕微鏡使用上の注意
ａ． 蛍光顕微鏡の工場出荷時の指示の要件に従って厳密に操作し、プログラムを任意に変更しないでください。 の
b. 検査は暗い部屋で行う必要があります。 暗室に入ったら、電源を接続し、超高圧水銀ランプを5-15分間点灯します。 光源からの強い光が安定した後、目が暗室に完全に慣れてから標本の観察を始めます。 の
c. 紫外線による目の損傷を防ぐため、光源を調整するときは保護メガネを着用してください。 の
d. 検査時間は毎回 1-2 時間であることが望ましいです。 90分を超えると超高圧水銀ランプの光度が徐々に低下し、蛍光が弱まってしまいますので、ご注意ください。 標本に紫外線を 3-5 分間照射すると、蛍光も大幅に弱まります。 したがって、最大でも 2-3 時間を超えてはなりません。 。 の
e. 蛍光顕微鏡の光源の寿命には限りがあるため、時間を節約し、光源を保護するために標本を集中的にチェックする必要があります。 天候が暑い場合は、熱を放散するためにファンを追加する必要があり、新しい電球を使用時間の開始時から記録する必要があります。 消灯後に再度使用する場合は、バルブが十分に冷えてから点灯してください。 1 日に数回光源を点灯することは避けてください。 の
f. 時間の経過とともに蛍光は徐々に弱まりますので、染色直後の標本を観察してください。 ポリエチレンビニール袋に入れて4℃で保存すると、蛍光が弱まる時間を遅らせ、封入剤の蒸発を防ぐことができます。 の
g. 蛍光の明るさの判断基準：一般に4段階に分かれており、「－」は蛍光が見られない、または弱いことを意味します。 「プラス」は、はっきりと目に見える蛍光のみが見られたことを意味します。 「プラスプラス」は明るい蛍光が見えることを意味します。 「プラスプラスプラス」は目に見える明るい蛍光を意味します。
