蛍光顕微鏡の各フィルターの機能
蛍光顕微鏡の最も重要な問題は、光学フィルターの組み合わせです。励起フィルターと遮蔽フィルターの両方が観察される蛍光物質に適しており、互いに適合している必要があります。一部の特定のアプリケーションでは、フィルターの選択に誤りがあると、誤解が生じ、さらには不正確な結果が生じる可能性があります。蛍光顕微鏡技術の成果は、高品質のフィルターと巧みに適合したフィルター グループから切り離すことができません。-蛍光顕微鏡用のフィルターにはいくつかの種類があります。
1. 熱吸収フィルター
熱吸収フィルターは、光源スペクトル内の熱放射による光学系の損傷を防ぐために必要なフィルターです。初期の高度な顕微鏡には、熱吸収装置として蒸留水を入れることができるドラム型のボトルが装備されていました。最新の大型研究用顕微鏡には、光源ライト ボックスまたはランプ チャンバー内に、透明でわずかに黄色のガラス シートであるガラス熱吸収フィルターが装備されています。 Leitz の KG1 (2 mm) および BG38 (4 mm) フィルターは、最大 98% の光透過率で、ほぼすべての紫外線および可視光スペクトルを透過できます。赤外線光熱放射のみを選択的に吸収します。
2. 励起フィルター
励起フィルターは長波長スペクトル線を選択的に吸収し、紫外光のみを透過します。紫、青、緑の光フィルターは励起フィルターです。 Zeiss、Reichert、Olympus の B シリーズ、G シリーズ、BG シリーズ、Shott の UG シリーズ、Opton の H、G、BP シリーズ、Leitz の BP シリーズなどの光学フィルターはすべて励起フィルターです。
3. ブロッキングフィルター
ブロッキングフィルターは、短波のスペクトル線と赤外線を選択的に吸収し、長波は見えるようにするフィルターです。その機能は、観察者の角膜を紫外線損傷から保護しながら、観察者が検査対象物によって励起された蛍光を見ることができるようにすることです。
4. 色分解フィルター
色分離フィルターは、励起光を検査対象物に反射して蛍光を発させ、その蛍光を接眼レンズに伝えるフィルターミラーです。このタイプのフィルターは落射光コンデンサーでのみ使用できますが、透過光蛍光顕微鏡では色分離は必要ありません。
5. 干渉フィルター
干渉フィルタは高性能励起フィルタの一種です。-研磨された2枚のガラスの間に数枚の薄い金属膜を重ねて作られたフィルターです。各金属薄膜の屈折率は異なるため、照明光源のさまざまな波長のスペクトル線が各金属薄膜上で繰り返し反射されます。特定の波長の一部のスペクトル線は相殺的干渉によって打ち消されますが、他のスペクトル線は付加的干渉によって強化されて透過します。これにより、透過スペクトルが狭く、ピークの半値幅がわずか 6 ～ 20nm のフィルターが得られます。透過率は60%〜70%に達します。
