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位相差顕微鏡法の基礎

Jun 07, 2023

位相差顕微鏡法の基礎

 

位相差顕微鏡は、透明な標本の細部を光が通過する際に生じる光路差(位相差)を光の強度差に変換する特殊な顕微鏡です。


光が比較的透明な標本を通過するとき、光の波長(色)も振幅(明るさ)もそれほど変化しません。 そのため、染色されていない標本(生きた細胞など)を通常の光学顕微鏡で観察すると、その形態や内部構造を区別することが困難になることがよくあります。 しかし、細胞の各部分の屈折率と厚さの違いにより、このような標本を光が通過するとき、直接光と回折光の光路は異なります。 光学的距離が増減すると、速い光波または遅い光波の位相が変化します (位相差が生じます)。 光の位相差は肉眼では感じることができませんが、位相差顕微鏡では、特殊な装置である環状絞りと位相板を介した光の干渉現象を利用して、光の位相差を振幅差(光と位相差)に変換することができます。暗い)人間の目で認識できるほど悪い)元の透明なオブジェクトの明暗の差が明確になり、コントラストが強調されるため、生きた細胞や見えない細胞内の細胞をはっきりと観察できます通常の光学顕微鏡や暗視野顕微鏡で観察できます。 特定の微細な構造。


位相差顕微鏡の結像原理: 顕微鏡検査中、光源は環状絞りの透明なリングのみを通過でき、コンデンサーを通過した後にビームに収束します。 偏向(回折)の度合い。 透明なリングによって形成された像は、対物レンズの後側焦点面にちょうど落ち、位相板上の共役面と一致します。 したがって、偏向されていない直接光は共役面を通過し、偏向された回折光は補償面を通過します。 位相板上の共役面と補償面の特性が異なるため、一定の位相差が生じ、2 つの部分を通過する光の強度がそれぞれ弱くなり、2 つの光グループは同じ面に収束します。後部レンズの収束後の光路。 直接光と回折光とが光干渉を起こし、位相差が振幅差に変化する。 このように、位相差顕微鏡を検査する際には、無色透明体を通過した光によって、人間の目では識別できない位相差が、人間の目で識別できる振幅差(明暗差)に変換される。

 

4 Microscope Camera

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