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蛍光顕微鏡写真のMERGE法

Apr 19, 2024

蛍光顕微鏡写真のMERGE法

 

論文などで蛍光写真が以下のようにマージされて紹介されているのをよく見かけます。マージによって、組織や細胞内の同じ場所にある 2 つ (またはそれ以上) の蛍光信号が重なっているかどうかを区別することができます。今日は、蛍光顕微鏡写真をマージする方法について説明します。

1、基本原則
基本原理は、2 枚 (またはそれ以上) の同じサイズの写真の同じピクセルのカラー データを、新しい色を得るための公式に従って再計算することです。たとえば、蛍光写真の赤と緑が重なって黄色になります。このアルゴリズムは、RGB の「カラー追加モード」 (以下を参照) に基づいており、Photoshop のレイヤー融合モード「カラー ドロップアウト」もほぼ同じです。


2、ソフトウェアの紹介
今日は、科学研究でよく使われるソフトウェア、ImageJ を紹介します。これを使用すると、写真を結合する方法が Ps よりも簡単で直接的です (レイヤーやレイヤー モードを気にする必要はありません)。ImageJ はインストールする必要がなく、ソフトウェアを USB スティックで開いて使用することもできます。


蛍光写真を結合する方法は 2 つあります。1 つは顕微鏡に付属のソフトウェアで結合する方法で、もう 1 つは同じ視野で異なる励起光による蛍光写真を保存し、結果を提示するときに通常の画像処理ソフトウェア (PS など) で結合する方法です。蛍光顕微鏡を見るときに蛍光の消光が心配な場合は (特に蛍光染料で染色した場合)、まずたくさんの写真を素早く撮影し、後で戻って良いものを選ぶことができます。蛍光顕微鏡を見るときに蛍光の消光が心配な場合は (特に蛍光染料で染色した場合)、まずたくさんの写真を素早く撮影し、後で戻って結果の提示に適したものを選ぶことができます。この場合、2 番目の方法の方が柔軟で快適かもしれません。

 

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