蛍光顕微鏡の使用: テクニックとスキル

蛍光顕微鏡の使用: テクニックとスキル

蛍光顕微鏡の技術パラメータ 1. 広角接眼レンズ 2. アクロマート対物レンズ 3. 4 穴対物レンズコンバーター 4. 落射蛍光装置 青 (B) 緑 (G) 励起システム 100W 水銀ランプ 5.同軸粗微焦点調整機構：調整 焦点範囲：15mm 微動グリッド値：0.002mm 6. 二層メカニカルテーブル 縦方向移動範囲：70mm 横方向移動範囲：50mm

スキルメソッドを使用する

(1) スライドガラス
スライド ガラスの厚さは 0.8 ～ 1.2 mm である必要があります。 スライドが厚すぎると、一方でより多くの光が吸収され、他方では、励起光を標本に集中させることができなくなります。 スライドは滑らかで、厚さが均一で、明らかな自家蛍光があってはなりません。 石英ガラスのスライドが使用されることもあります。

(2) カバーガラス
カバーガラスの厚さは約0.17mmで、滑らかです。 励起光を強化するために、干渉カバー ガラスを使用することもできます。これは、異なる波長の光に対して異なる干渉効果を持つ物質 (フッ化マグネシウムなど) の複数の層でコーティングされた特殊なカバー ガラスです。蛍光もスムーズに進みます。 励起光は透過および反射され、この反射した励起光が試料を励起する。

(3) 標本
組織切片やその他の標本は厚すぎてはいけません。 厚すぎると、励起光の大部分が試料の下部で消費され、対物レンズで直接観察される上部が完全に励起されなくなります。 また、セルの重なりや不純物カバーなども判定に影響します。

(4) 封入剤
グリセリンは封入剤として一般的に使用されますが、自家蛍光がなく、無色透明である必要があり、蛍光の明るさは pH 8.5-9.5 でより明るく、すぐに色あせしにくいです。 したがって、グリセロールとpH 9.0〜9.5の0.5mol/l炭酸緩衝液の等量混合物がマウント剤として一般的に使用されます。

(5)ミラーオイル
一般に、暗視野蛍光顕微鏡や油浸レンズで標本を観察する場合には、液浸油を使用する必要があります。 特別な無蛍光イマージョンオイルを使用するのが最善です。 上記のグリセリンでも代用できますし、流動パラフィンも使用できますが、屈折率が低いため画質への影響は若干あります。 影響。