組織ブロックの体積を観察する生物顕微鏡
コンデンサーを備えた生物顕微鏡では、コンデンサーを上下に動かして明るさを適度にすることができ、また、変光器の絞りを変更して9bという適度な明るさを実現することもできます。 光が太陽の下にある場合、コンデンサーを適切に持ち上げることができ、可変光ノイズの開口を適切に拡大することができます。 光が強すぎる場合には、コンデンサーを適切に下げて、交差点の口径を適切に小さくすることができます。 この場合でもまぶしさを感じる場合は、適切なフィルターを選択し、コンデンサーの下のブラケットに配置します。 ご満足いただける明るさが得られるタッサーです。 もちろん、コンデンサーの上下の位置を調整して光学読み取りの開口サイズを変更したり、適切なフィルターを選択したりするには、ある程度の練習を経て経験を積む必要があります。
生体顕微鏡の非常に重要な問題は、凍結乾燥および樹脂包埋(FD)および凍結乾燥後の各部品の65種類の元素の含有量を、観察および分析する細胞を損傷しないように慎重に取り扱う必要があることです。 X線微量分析は工程数が多いだけでなく、費用も高額であるため、分析した細胞が損傷細胞や長期多段階の処理を経て死んだ細胞である場合、誤った結論を導き出すことは非常に残念です。 例えば、コラゲナーゼ処理により分離された心筋細胞には、長い棒状と丸い形状の2つの形状があります。 後者は、細胞分離中に損傷を受けた瀕死の細胞です。
これら 2 種類の細胞内の電解質の含有量と分布は、生物顕微鏡で観察すると大きく異なります。 円形の心筋細胞ではNaが非常に高く、Kが非常に低く、線状の樹状突起ではca濃度が非常に高くなります。 他の分析方法と比較すると、円形細胞の高 Na および低 K、およびミトコンドリアの高 Ca は、細胞分離時の細胞膜損傷の結果であることが証明されています。 細胞や組織の低温固定方法は、多くの場合、最初に急冷して固定し、次に液体窒素で保存します。 焼入れ固定は保存効果にとって非常に重要です。 生きた細胞や新鮮な組織には水分が豊富に含まれています。 急冷する場合、凍結保護剤と直接接触する細胞または組織の部分(特に液体窒素で急冷する場合)が最初に凍結して固定されることが多く、その結果「殻」が形成され、中心部の凍結と固定が妨げられます。細胞の一部。 したがって、X 線微量分析を行うと、大きな細胞の中心に氷の結晶があることがよくわかります。 これを防ぐために、液体窒素より融点が高く、乾燥温度が806度より低い物質を冷却剤として使用します。 このような物質は数多くありますが、最も簡単に入手できるのは濃プロパン(沸点-42.120℃、融点-187.10℃、分子量-44.1)です。最速の冷却速度。 しかし、その欠点は可燃性です。
生物顕微鏡は筋線維を特別なフレーム上に置き、筋線維が一定の段階まで収縮して固定する必要がある場合、すぐにノズルを起動し、液体プロパンを筋線維に噴霧して急冷して固定します。それ。 次に筋繊維をラックごと取り出し、液体窒素の中に入れます。 血球や分離した細胞が固定されている場合は、まず低速遠心分離して細胞を濃縮し、熱伝導率の良い銀色の細管に移し、液体プロパン中に入れて凍結固定します。 ホール実験室でラットの膵臓を固定するとき、2 つの鉄のブロックを液体ヘリウム (または液体窒素) で予冷し、2 つの銅のブロックをペンチで膵臓の前後に置き、おばさんを急冷して固定しました。 組織または細胞は、急冷して固定し、液体窒素に移した後、長期間保存できます。






