組織ブロックの体積に対して行われた生物顕微鏡検査
生物顕微鏡コンデンサー付きの顕微鏡では、コンデンサーを上下に動かして明るさを適度にしたり、可変光の絞りを変えて適度な明るさにしたりできます。光が明るい場合は、コンデンサーを上方に動かして可変光の絞りを大きくすることができます。光が強すぎる場合は、スポットライトのミラーを適宜下げて、可変光の絞りを適宜小さくすることができます。それでもまだ眩しいと感じる場合は、スポットライトの下のブラケットに適切なフィルターを取り付けることができます。これにより、満足のいく明るさを得ることができます。もちろん、コンデンサー レンズの上下の位置を調整することで、読み取り光の絞りのサイズを変えたり、適切なフィルターを選択したりできますが、これは一定期間の練習と経験を積んだ後のことです。
生物顕微鏡で非常に重要な問題は、細胞のサンプリングと分離、凍結乾燥と樹脂包埋（FD）のプロセスで、凍結乾燥後の各部分の65の元素組成含有量の微細化を非常に慎重に行う必要があり、観察および分析する細胞を損傷してはなりません。X線微小領域分析は手順が多いだけでなく、コストも非常に高いため、長い時間と複数の処理手順の後に分析された細胞が損傷した細胞または死んだ細胞である場合、誤った結論を導くことは非常に残念です。たとえば、コラーゲナーゼ処理によって分離された心筋細胞には、長い棒状のものと丸いものの2つの形態があります。後者は、細胞分離プロセス中に損傷を受けた死にかけている細胞です。
生物顕微鏡 筋線維を専用のラックに置き、この筋線維の収縮が固定する必要がある特定の時間段階に達するようにし、その後すぐにノズルを作動させて、液体プロパンを筋線維に噴霧し、急冷して冷固定します。次に、筋線維をラックと一緒に取り出し、液体窒素に入れます。血球または単離細胞を固定する場合は、最初に低速遠心分離して細胞を濃縮し、細胞を熱伝導率の良い銀管に移し、管を液体プロパン死体に入れて冷固定します。ホール研究室では、ラットの膵臓を固定し、最初に2つの鋼片を液体ヘリウム（または液体窒素）で予冷し、クランプで挟んだ2つの銅片を膵臓の前後に配置して、腺のおばさんを急冷固定します。組織や細胞は、急冷固定後に液体窒素に移すことで長期間保存できます。
生体顕微鏡検査 現在*推奨*されている凍結超薄切片法に加えて、科学者が使用する別の沈着技術についてここで説明します。分析前に物質を追加し、分析対象の成分と沈着物を形成して固定化し、その後沈着物を分析します。たとえば、シュウ酸塩とピロアンチモネートは、心筋細胞にカルシウムを沈着させるのによく使用されます。前者は細胞質内のカルシウム濃度が低い場合、感度が不十分です。ピロアンチモネートは感度が高く、血漿中の遊離カルシウムと電子密度の高い沈着物を形成しますが、ピロアンチモネートはナトリウム、マンガン、バリウム、鉄とも沈着物を形成しますが、これらの元素は特異性が低くなります。 標本作製のプロセスは、通常の透過型電子顕微鏡超薄切片標本と同様であるが、固定前に3%ピロアンチモン酸カリウム（リン酸緩衝液、pH 7.6）を6時間固定し、筋肉の染色された超薄切片で、各筋切除切片のA帯と2本の帯の正中に黒色の沈殿物が見られ、その後、未染色切片をX線微小領域分析に使用した点が異なる。ジアミノベンジジン四塩酸塩（DAB）は、特にヘモグロビン含有物質の沈殿に使用されている。このような組織化学とX線微小領域ブリッジの沈殿反応は、凍結超薄切片の条件がない研究室で使用できると考えられる。分析対象元素のピーク高さは、半定量分析に使用できる。
