顕微鏡下の視野の面積を計算する

顕微鏡下の視野の面積を計算する

顕微鏡下での病理学的読影は、病理学者の仕事の重要な内容の 1 つです。顕微鏡観察と記録の結果は、臨床診断の科学的根拠となります。顕微鏡を正しく標準的な方法で使用して初めて、結果を科学的に観察し記録することができます。周知のように、顕微鏡の画像は、まず対物レンズによって標本に拡大され、次に接眼レンズによって拡大されて人の目で観察されます。視野の大きさは接眼レンズの視野によって決まります。この記事で説明する観察と記録は、顕微鏡の接眼レンズを通して行われることに注意してください。CCD、デジタルカメラ、ソフトウェア操作による画像取得など、接眼レンズを通した観察を伴わないその他の光路については、別途説明します。顕微鏡の接眼レンズの視野数 (フィールド番号、FN) が異なると、ミラーの下で見ることができる視野の大きさが異なり、ミラーの面積が異なると、陽性率に影響するため、接眼レンズの視野数と視野の面積の関係を理解する必要があります。 視野数が小さいと視野領域が小さいことがわかります。反対に、視野数が大きいと視野領域が広いことがわかります。

1 接眼レンズ視野識別番号

顕微鏡は国際標準に基づいて設計・製造されており、顕微鏡の接眼レンズには視野がマークされています。例えば、オリンパス BX50 顕微鏡の接眼レンズの視野番号は 22 です (22 の前の数値は英語で、数字は識別用の接眼レンズの分類名と倍率です)。

2 実際の視野と計算式

顕微鏡で観察できる標本面上の領域（円形の領域）を実視野（FOV）と呼び、その大きさは次の式で計算できます。

3 対物レンズの倍率

対物レンズは、顕微鏡画像化に使用される重要な光学部品です。生物顕微鏡で一般的に使用される対物レンズの倍率は、4、10、20、40、100 です。病理学的計数に一般的に使用される高倍率対物レンズは 40 です。

4 中倍率

接眼レンズを通して直接観察する場合、中間倍率は考慮されません。中間倍率とは、CCD インターフェース、写真接眼レンズ、および光路に追加された CCD コンポーネントの倍率を指します。現在使用されている顕微鏡のほとんどは、蛍光観察、局所収差観察、微分干渉観察などを追加した無限範囲イメージング システムであるため、コンポーネントによって倍率が変わることはなく、考慮する必要はありません。

5 視野エリア下の一般的な接眼レンズ

最も一般的に使用されている接眼レンズの視野は 22 です。さまざまな顕微鏡メーカーが、視野 25 の広視野接眼レンズや、視野 265 の超広視野接眼レンズを次々と設計・製造してきました。視野が 18 や 20 と小さい接眼レンズもあります。