蛍光顕微鏡とレーザー共焦点顕微鏡の違い

蛍光顕微鏡とレーザー共焦点顕微鏡の違い

蛍光顕微鏡
1. 蛍光顕微鏡は、紫外光を光源として検出対象物に照射して蛍光を発させ、顕微鏡下で対象物の形状や位置を観察します。 蛍光顕微鏡は、細胞内の化学物質の吸収、輸送、分布、位置を研究するために使用されます。 クロロフィルなどの細胞内の一部の物質は、紫外線の照射後に蛍光を発することがあります。 他の物質はそれ自体では蛍光を発しませんが、蛍光色素や蛍光抗体で染色し、紫外線を照射すると蛍光を発します。 蛍光顕微鏡は、これらの物質の定性的および定量的な研究のためのツールの1つです。
　

2、蛍光顕微鏡の原理:
(a) 光源： 光源はさまざまな波長（紫外から赤外まで）の光を放射します。
(b) 励起フィルター光源: サンプルを蛍光させることができる特定の波長の光を透過させ、励起蛍光に役に立たない光を遮断します。
(c) 蛍光標本: 通常は蛍光色素で染色されます。
(d) ブロッキングフィルター：標本に吸収されなかった励起光を遮断して蛍光を選択的に透過させ、蛍光の一部の波長も選択的に透過させる。 紫外線を光源として照射対象物を蛍光発光させる顕微鏡。 電子顕微鏡は、1931 年にベルリンでクノールとハ ロスカによって初めて組み立てられました。この顕微鏡は、光ビームの代わりに高速電子ビームを使用します。 電子流の波長は光波の波長よりもはるかに短いため、電子顕微鏡の倍率は80万倍に達し、最小分解能限界は0.2ナノメートルです。 1963 年に使用され始めた走査型電子顕微鏡は、物体の表面の小さな構造を見ることができます。

3. 適用範囲: 小さなオブジェクトの画像を拡大するために使用されます。 一般的には生物学、医学、微粒子の観察に応用されています。

共焦点顕微鏡
1. 共焦点顕微鏡は、反射光の光路上に半反射半レンズを追加し、レンズを通過した反射光を他の方向に屈折させます。 焦点にはピンホールを備えたバッフルがあり、ピンホールは焦点に位置します。 バッフルの後ろには光電子増倍管があります。 検出光の焦点の前後の反射光はこの共焦点系を通過し、小穴には焦点を結ばずバッフルに遮られると考えられます。 したがって、光度計は焦点での反射光の強度を測定します。
　

2. 原理: 従来の光学顕微鏡はフィールド光源を使用しており、標本上の各点の画像は隣接する点の回折光または散乱光によって干渉されます。 レーザー走査型共焦点顕微鏡は、照明ピンホールを通過したレーザー光によって形成された点光源を使用して、標本の焦点面のあらゆる点を走査します。 試料上の照射点は検出ピンホールに結像され、ピンホールを検出した後、光電子増倍管（PMT）または冷結合素子（cCCD）で点ごとまたは線ごとに受光され、蛍光画像が迅速に結像されます。パソコンのモニター画面。 照明ピンホールと検出ピンホールは対物レンズの焦点面に対して共役であり、焦点面上の点は照明ピンホールと発光ピンホールに同時に焦点を結び、焦点面の外側の点は焦点を合わせません。検出ピンホールで結像されるため、得られる共焦点画像は試料の光学断面であり、一般的な顕微鏡の画像がぼやけるという欠点を克服します。

3. 応用分野：医学、動植物研究、生化学、細菌学、細胞生物学、組織と胚、食品科学、遺伝学、薬理学、生理学、光学、病理学、植物学、神経科学、海洋生物学、材料科学、電子科学、力学、石油地質学、鉱物学。