直接微生物学的顕微鏡計数
ヘマトクリットプレートを使用して顕微鏡下で直接カウントする方法は、微生物の計数によく使用される方法です。この方法の利点は、直感的で迅速であることです。適切に希釈された細菌懸濁液(または胞子懸濁液)を、ヘマトクリットプレートのスライドとカバーガラスの間の計数チャンバーに入れ、顕微鏡下でカウントします。計数チャンバーの容積は一定(0.1 mm2)であるため、顕微鏡下で観察された微生物の数は、単位容積あたりの微生物の総数に変換できます。この方法は、生きている微生物と死んだ微生物の合計をカウントするため、総細菌数とも呼ばれます。
ヘマトクリットプレートは、通常、4 つのスロットからなる 3 つのプラットフォームを備えた特殊なスライドです。中央のプラットフォームは短い水平溝によって 2 つの半分に分割され、プラットフォームの各側面には正方形のグリッドが刻まれており、各正方形のグリッドは合計 9 つの大きな正方形に分割されています。大きな正方形の中央は計数室であり、微生物の計数は計数室で行われます。血液計数プレートは、図 VIII-1 に示されています。
計数箱のスケールは、一般的に 2 つのサイズがあります。1 つは、大きな正方形が 16 個の中サイズの正方形に分割され、各中サイズの正方形が 25 個の小さな正方形に分割されているものです (図 VIII-2)。もう 1 つは、大きな正方形が 25 個の中サイズの正方形に分割され、各中サイズの正方形が 16 個の小さな正方形に分割されているものです (図 VIII-1、C)。ただし、各大きな正方形内の小さな正方形の数は、どちらのサイズの計数箱でも同じで、図 VIII-2 に示すように、16 × 25=400 個の小さな正方形です。
各大きな正方形の辺の長さは 1 mm なので、各大きな正方形の面積は 1 mm2 です。カバーガラスを覆った後、スライドとカバーガラスの間の高さは 0.1 mm なので、計数室の容積は 0.1 mm3 です。
数えるときは、通常、中央の 5 つの四角形に含まれる細菌の総数を数え、各四角形の平均値を取得し、それを 16 倍または 25 倍して 1 つの大きな四角形に含まれる細菌の総数を算出し、それを 1 ml の細菌溶液に含まれる細菌の総数に変換します。
