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レーザー共焦点顕微鏡のレーザー強度の調整方法

Sep 14, 2023

レーザー共焦点顕微鏡のレーザー強度の調整方法

 

レーザー強度には 2 つの調整要素があります: パワーコントロールノブと音響光学調整可能フィルター (AOTF)。


1. パワーコントロールノブ: 通常、* の大きい値の 30% に設定します。 出力の増加に伴いレーザーの寿命は短くなり、レーザーノイズも発生します。 良好な強度を得るために、最初に AOTF、PMT などを調整する必要があります。


2. 音響光学調整可能フィルター: 励起光ビームと強度を制御し、ミリ秒の速度でレーザーをオンまたはオフにしたり、0-100 パーセントの間で変化するように調整したりできます。 このようにして、各画像点に異なるレーザー ビームを使用でき、必要な強度を選択できます。


動作原理:さまざまな媒質中を伝播する音波のブラッグ回折効果を利用します。 AOTFは、ある周波数のRF信号が入力されると、入射した多色光を回折し、入ってきた波長の単色光を選択します。 単色光の波長は RF 周波数 f と 1 対 1 に対応しており、電気信号を調整することで出力の波長を迅速かつランダムに変更できます。 AOTFはレーザー強度を連続的に調整することができ、局所的な刺激と走査を実現する高速調整機能と、高速な波長切り替え(マイクロ秒レベル)の機能を備えています。 レーザー共焦点顕微鏡では、光電子増倍管はレーザー強度を高めることはできませんが、撮像後に光電強度を調整できるため、光電子増倍管の電圧を調整することで画像の明るさを調整できます。 さらに、ピンホールの大きさは光子の量に影響し、画像の明るさを調整することもできます。 光電子増倍管は、紫外光、可視光、近赤外光に非常に敏感な特殊な真空管です。 入ってくる微弱な光信号を108倍に増幅して光信号を測定することができます。

 

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