多光子レーザー走査型顕微鏡のメリットとデメリットの紹介

多光子レーザー走査型顕微鏡のメリットとデメリットの紹介

多光子レーザー走査型顕微鏡の利点:

1. 赤色光または赤外光で励起されると光の散乱が小さく、小さな粒子の散乱は波長の 4 乗に反比例します。

2. イメージングセクションからのより多くの散乱光子をピンホールなしで収集できます。

3. ピンホールは非焦点領域または焦点領域から放出される散乱光子を区別できず、深層での多光子イメージングの信号対雑音比は良好です。

4. 単一光子励起に使用される紫外光または可視光は、ビームが焦点面に到達する前にサンプルによって吸収および減衰されやすいため、深層を励起するのは容易ではありません。

5. 生物顕微鏡観察においては、生物そのものの活性状態を損なわないこと、また水、イオン濃度、酸素、栄養素の循環が維持されることを第一に考えます。 光観察の場合、熱も光子エネルギーも細胞にダメージを与えない照射量と光エネルギー以内に収める必要があります。

6. 多光子顕微鏡には多くの利点があります。 三次元分解能、深い侵入、散乱効率、背景光、信号対雑音比、制御などはすべて、以前のレーザー顕微鏡にはなかった、または超えることができなかった特性を備えています。

多光子レーザー走査型顕微鏡の欠点:
1. 蛍光イメージング専用。

2. サンプルに励起光を吸収する発色団が含まれている場合、サンプルは熱損傷を受ける可能性があります。

3. 解像度が若干低下します。 共焦点絞りを併用することで改善できますが、信号が失われます。

4. 高価な超高速レーザーには限界があるため、多光子走査型顕微鏡のコストは比較的高くなります。