顕微鏡スライドの作成方法

顕微鏡スライドの作成方法

顕微鏡スライドを作成する方法は 3 つあります。

1. 塗抹法
塗抹法は、スライド上に材料を均一に塗布する調製方法です。

塗抹標本には、単細胞生物、小さな藻類、血液、細菌培養物、植物や動物の遊離組織、精巣、葯などが含まれます。

塗りつける際には注意が必要です:
（１）スライドは清潔でなければならない。

（２）スライドは平らに保持される必要があります。

3) コーティングは均一に行う必要があります。コーティング液をスライド中央右側に滴下し、解剖ナイフの刃やつまようじなどでよく広げます。

4) コーティングは薄くする必要があります。別のスライドを押し器として使用し、塗布溶液を滴下したスライドの表面に沿って右から左にゆっくりと押し（2 つのスライド間の角度は 30 度から 45 度である必要があります）、均一に薄い層を塗布します。

5) 固定。固定が必要な場合は、化学固定剤または乾燥（細菌）固定剤を使用します。

6) 染色。細菌にはメチレンブルー、血液にはレイチェル染色を使用します。染色液はコーティングされた表面全体を覆う必要があります。

7) すすいで、吸収紙に吸い取らせるか、天日干しで乾かします。

8) フィルムを密封します。長期保存の場合は、カナダ産の樹木用フィルムを使用してください。

2. フィルムプレス法
圧力フィルム法は、スライドとカバーシートの間に生物学的材料を置き、一定の圧力を加えることで組織細胞を押し離す調製方法です。

（１）材料を採取する。細胞分裂を観察するには、細胞分裂が活発で新鮮な組織細胞を材料として選択する必要があります。例えば、根端、茎端分裂組織、骨髄細胞、葯（花粉母細胞）、精巣（精原細胞）などです。

（2）固定。材料の固定は必要に応じて決定できます。材料を採取した直後に圧力フィルムを観察し、別途固定処理（および染色同期）を行うことはできません。材料を採取した直後に検査しない場合は、材料を固定液（通常はアルコール酢酸塩固定液を使用）で固定できます。95％エタノールで洗浄した後、2〜24時間（材料によって異なります）固定し、70％エタノールで保存して待機します。

（３）解離。細胞は加水分解分離溶液（１Ｎ ＨＣｌまたは塩酸アルコール溶液など）処理で材料を分散させることが容易ではないため、通常処理は６～２０分で、解離後、染色前に水ですすいでください。

（4）染色。染色には多くの種類がある。染色体の観察には、マゼンタ酢酸染色液で染色するのが一般的である。

（５）フィルムプレス。スライド上に材料を置き、水または染色液を一滴加え、カバーガラスをかぶせて親指でスライドを軽く押します。

（６）観察。フィルムをプレスした後、顕微鏡で観察することができます。