暗視野顕微鏡の原理と特徴

暗視野顕微鏡の原理と特徴

暗視野顕微鏡は、暗視野顕微鏡とも呼ばれ、サンプルに横方向の光を照射したときに発生する散乱光を観察することでサンプルの詳細を識別するための特殊な顕微鏡です。

1、暗視野顕微鏡の原理と構造的特徴
暗視野顕微鏡と一般的な明視野顕微鏡の違いは、集光装置が異なることです。暗視野顕微鏡には中央の暗くなった集光装置が装備されているため、光は集光装置を通過できず、集光装置の周囲の縁からのみ、暗くなった部分の斜光がスライド上の標本に照射されます。光が斜めであるため、対物レンズに入ることができず、観察視野が暗くなります。また、集光装置から細菌に斜めの光が当たると、光の散乱効果により細菌が明るい光を発し、対物レンズに反射して戻ります。そのため、顕微鏡では暗い視野で明るい物体の像を見ることができます。

暗視野顕微鏡は主に、染色されていない標本の形態と運動性を調べるために使用されます。

2、操作方法
①研究用暗視野顕微鏡を使用するか、通常の光学顕微鏡のコンデンサーを取り外して暗視野コンデンサーに交換します。

② ドライ対物レンズを使用する場合でも、油浸対物レンズを使用する場合でも、顕微鏡観察中に濃縮器の上部レンズにシダーオイルを一滴多めに滴下する必要があります。

③ 準備した吊り下げ滴下標本の切片をキャリアテーブルに置き、濃縮器を一番上まで上げてオイルをスライドに接触させます。

④光源を拡大します。

⑤ 集光器の光軸調整とピント合わせを行います。10倍対物レンズを使用して検査対象を見つけ、集光器の絞りを視野の輪郭が視野絞りで見える範囲まで閉じ、集光器をゆっくり上下に調整します。これにより、視野絞りの画像が鮮明になります。視野絞りが視野の中心にない場合は、2つの調整ノブを使用して集光器を視野の外側に調整し、明るいスポットが視野の中心に調整されたら、それを開いて観察を行うことができます。

3、注意事項
①暗視野観察用対物レンズの絞り値は1.25程度にしてください。高すぎると効果が出ません。※視野絞り対物レンズと一緒に使用するとより良く、対物レンズの真ん中の調整リングを回すと、絞りのサイズの値を変更できます。

使用するスライドとカバーガラスには傷やほこりが付いていないこと、対物レンズの前のレンズは清潔でほこりが付いていないことが必要です。スライドとカバーガラスの厚さは標準に準拠している必要があります。スライドが厚すぎると、コンセントレータの焦点がスライド内に落ち、検査対象の平面に到達できません。オイルレンズを使用すると、対物レンズの作動距離が非常に短く、焦点を合わせることさえできず、検査対象が見えなかったり、見えなかったりします。

③ 顕微鏡観察中は室内を暗くする。暗くできない場合は、遮光装置を可能な限り使用して接眼レンズ周辺の光が入らないようにする。

④オイルミラー検査では、オイル内の不純物や気泡が乱反射し、ミラー効果の視野を妨げるため、オイル内の不純物や気泡を極力取り除く必要があります。