共焦点顕微鏡の原理とその分野
1、共焦点顕微鏡では、反射光は光路上に半反射半レンズを加え、レンズを通過した反射光は他の方向に折り畳まれ、焦点にピンホールのあるバッフルがあり、その穴は焦点に位置し、バッフルの後ろには光電子増倍管があります。この共焦点システムを通過すると、焦点の前後の反射光が検出器の光によって小さな穴に焦点を合わせることができず、バッフルによってブロックされることが想像できます。そのため、光度計は焦点での反射光の強度を測定します。
2、原理:従来の光学顕微鏡はフィールド光源を使用しており、試料上の各点の画像は、隣接する点からの光の回折または散乱によって干渉されます。レーザー走査型共焦点顕微鏡は、レーザー光線を照明ピンホールに通して試料上に点光源を形成し、試料上の各点を走査して焦点面にします。試料に照射され、画像化時にピンホールが検出され、ピンホールの検出後に光電子増倍管(PMT)または冷電結合装置(cCCD)が点ごとに、または点ごとに光の強度を光度計で測定します。cCCD)は点ごとに、または線ごとに光を受け取り、コンピューターのモニター画面上に蛍光画像を迅速に形成します。 照明ピンホールと検出ピンホールは対物レンズの焦点面に対して共役であり、焦点面上の点は照明ピンホールと発光ピンホールに同時に焦点が合わされ、焦点面外の点は検出ピンホールに結像されないため、共焦点画像は標本の光学断面となり、通常の顕微鏡のぼやけた画像の欠点を克服します。
3、応用分野:医学、動植物研究、生化学、細菌学、細胞生物学、組織胚、食品科学、遺伝学、薬理学、生理学、光学、病理学、植物学、神経科学、海洋生物学、材料科学、電子科学、力学、石油地質学、鉱物学。
