倒立蛍光顕微鏡の適切な使用方法

Jun 07, 2023

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倒立蛍光顕微鏡の適切な使用方法

 

倒立蛍光顕微鏡は、ハイエンドの生物科学研究の分野で使用される多機能顕微鏡です。 その構造は複雑で高価です。 したがって、医学系大学院生が倒立型蛍光顕微鏡の操作と使用法を正しく理解するためには、まず教師が倒立型蛍光顕微鏡の実際の操作をデモンストレーションする必要があります。 従来は、倒立型蛍光顕微鏡の構造、原理、機能、基本的な使用方法を紹介し、具体的な操作では試料ごとに浅いところから異なる機能を発揮する倒立型蛍光顕微鏡の基礎知識を学ぶコースを設置していました。医学系大学院生による倒立蛍光顕微鏡の使用を標準化する。


1. 明視野観察の正しい使い方。 倒立蛍光顕微鏡の機能の一つに明視野観察があります。 基本原理は、標本に光を照射した後、各部分の光吸収が異なることで明るい背景での撮影を実現します。 主に細胞の染色や着色、組織切片などの標本の観察に適しています。


2.位相差観察の正しい使い方。 倒立蛍光顕微鏡の2つ目の機能は位相差観察です。 その基本原理は、サンプルの異なる部分の光路差を振幅差に変換することです。 観察は、位相板を備えた位相差対物レンズとリング絞りを備えたコンデンサーレンズによって実現されます。 主に生きた細胞や未染色の組織切片の観察に適用されます。実験指導の過程では、位相差観察の基本的な操作方法を医学大学院生に正しく指導することに加えて、位相差観察の基本的な操作方法を正しく指導することがより重要です。位相差観察に使用する標本を理解し、習得します。 彼らにとって、培養細胞の顕微鏡観察は、将来の科学研究で最も一般的に使用されます。 まず、細胞機器の選択ですが、一般的にはガラス製やプラスチック製の培養皿、培養プレート、培養ボトルを使用することが推奨されています。 それらのほとんどは無色透明であり、細胞液を流し出すなどの処理をすることなく、倒立蛍光顕微鏡で直接観察することができます。 次に、細胞を汚染しないように、顕微鏡観察中は装置のカバーを勝手に開けないでください。 最後に、オペレーターは手袋、マスク、白衣を着用する必要があります。これにより、自分の健康を守るだけでなく、細胞の汚染を防ぐことができます。


3. 蛍光観察の正しい使い方。 倒立型蛍光顕微鏡の3つ目の機能は蛍光観察です。 基本原理は、励起光を用いて試料を励起して蛍光を発生させ、試料の形状や位置の観察を実現することです。 主に蛍光標識サンプルの観察に適しています。 倒立蛍光顕微鏡は蛍光観察が重要な機能ですが、その付属品は高価で使用方法も特殊です。 医学系大学院生が蛍光観察の操作と使い方を正しく理解するためには、教師は基本的な操作方法を教えるだけでなく、その特殊性を習得できるように指導することが重要です。 まず、標本の作製にあたっては、スライドガラスとカバーガラスの表面が滑らかで、適切な厚さ(スライドガラスは0.8mmから1.2mm、カバーガラスは約{1}}である必要があります)。 {5}}.17mm); 標本は適切な厚さを持ち、細胞の重なりや不純物によるマスキングを避ける必要があります。 封入剤には、グリセロールと炭酸緩衝液の等量混合物(0.5mol/L pH9.0-9.5)を使用する必要があります。 次に、蛍光観察を行う前に、部屋の電気や倒立蛍光顕微鏡の白色光を消し、暗室の環境を確保する必要があります。 最後に、蛍光観察では観察時間を厳密に管理する必要があります。一般的には 1-2 時間/回が適切です。そうでないと蛍光が減衰して消えてしまいます。 光源を調整するときは、紫外線によるメガネの損傷を避けるために保護メガネを着用してください。


4. 画像キャプチャの正しい使用。 科学研究においては、倒立型蛍光顕微鏡でさまざまな観察ができることだけでなく、画像を取得できることも求められます。 倒立蛍光顕微鏡システムは、光学顕微鏡とコンピュータを光電変換により組み合わせたもので、接眼レンズでの顕微鏡観察だけでなく、リアルタイムの動画像観察やコンピュータ上での編集・保存が可能です。

 

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