生物顕微鏡の使用とメンテナンス
生物顕微鏡は、生物学的スライス、生物学的細胞、細菌および生きた組織の培養、液体の沈殿などを観察および研究するために使用されます。
透明・半透明の物体や粉体・微粒子などの観察が可能です。 今日は生物顕微鏡の使用とポストプロダクションについて話しましょう
生物顕微鏡の使用
(1) 使用環境と作業習慣
1. 使用環境
顕微鏡の作業場所は清潔で乾燥しており、振動や腐食性ガスのない場所にしてください。
2. 仕事の習慣
(1) テーブル及びスツールの高さは適切であること。
(2) 顕微鏡検査の際は、単眼顕微鏡であっても両目を同時に開き、左目を観察する必要があります。 右目で描画または記録する場合。 片目を開け、もう一方の目を閉じると目が疲れやすく、長時間見ることができません。 長時間の作業時は両目で交互に観察できます。
(2) 使用前の準備
1. 光学系の設置
新しく購入した顕微鏡や光学系を取り外した顕微鏡の場合は、使用前に顕微鏡を設置する必要があります。 取り付けの際は、ゴミが下に落ちるのを防ぐため、接眼レンズ、対物レンズ、集光レンズ、反射鏡の順で上、下の順に取り付けてください。 図10-3-1は顕微鏡の設置図です。 矢印は光学系が取り付けられている場所を示しています。
対物レンズを取り付ける際は、コンバーターとステージとの間に一定の距離を保つために、鏡筒を先に上げるか、キャリアステージを下げてください。 次に、対物レンズを持ってコンバーターのネジ口に差し込み、反時計回りに少し回転させます。 対物レンズにシルクパターンが取り付けられたら、適度にきつくなるまで時計回りにねじ込みます。 対物レンズを取り付ける際は、対物レンズの倍率に応じて小から大の順に時計回りに取り付けてください。 対物レンズを変換するときは、対物レンズを手で押して回転させないでください。対物レンズの光軸が傾いてしまいます。 コンバーターの回転ディスクを手で持って回転させるか、対物レンズコンバーターとの接合部にあるローレット状の外円を手で持って回転させると良いでしょう。
接眼レンズと対物レンズを取り付けたら、ステージ下のコンデンサーブラケットにコンデンサーを挿入します。 挿入の高さは、コンデンサーを最高点まで上げたときに、スライドガラスとレンズの衝突を防ぐために、コンデンサー上のレンズの端面がステージの平面よりわずかに低くなるような高さである必要があります。コンデンサーの。 次に、コンデンサーの固定ネジを締めます。 非電気光源を備えた顕微鏡の場合、反射鏡は最終的にコンデンサーの下のソケットに挿入されます。
2. 光軸を校正する
光軸補正の意義は、対物レンズ、接眼レンズ、コンデンサーの主光軸と可変絞りの中心点を直線上に一致させることです。 そのため、同軸調整や中心調整とも呼ばれます。 光軸が傾くと収差が大きくなり、解像度や鮮鋭度が低下します。
検査方法は、可変絞りを最大限に開き、低倍率対物レンズを光軸にねじ込み、対物レンズとステージとの距離が対物レンズの作動距離より小さくなるように鏡筒を下げます。レンズ（5mm以下）。 試料を置かずに、視野が最も明るくなるように反射板の角度を調整します。 または光源ランプの明るさを調整して、明暗に適した視野を作ります。
次に、接眼レンズのプラグを抜き、チューブを通して直接見てください。 可変絞りを何度かゆっくり縮めたり開いたりしながら、絞りを最小まで絞ったとき、ちょうど絞りの像（この時はほんの少しだけ）が対物レンズの絞りの中心に来るはずです。 絞りをある程度開くと、絞りの像が対物レンズの絞りの黒丸と一致するはずです。 上記2つの条件を満たしていれば「同軸」であることを意味します。 それ以外の場合は調整が必要です。
接眼レンズと対物レンズは両方とも固定されており、調整することはできません。 同軸調整は主にコンデンサーの位置調整です。 一部の顕微鏡では、コンデンサーブラケットの両側に光軸補正ネジが2本付いており、この2本のネジを調整することで軸を合わせることができます。 別の種類の集光器は、フレーム上で 120 度離れた 3 本のネジで支持されており、そのうちの 1 本にはバネが取り付けられており、伸ばすことができます。 他の 2 つのネジは回転できます。 2 本のネジをシャフトに合わせて調整します。
顕微鏡の光軸を校正した後、コンデンサーを取り外さないなど特別な理由がある場合は、頻繁に校正を行う必要はありません。
3. 標本の準備
後で使用できるように高品質の標本を準備します。
(3) リフレクターやコンデンサーの使い方と光の調整方法 1. 調光
ミラーを使用する顕微鏡では、太陽の散乱光を反射するために平面ミラーが一般的に使用されます。 凹面反射板は、暗い場所、または窓の外に邪魔なものがある場合にのみ使用してください。
電気光源を使用する顕微鏡の場合は、明るさを適切に調整してください。
2. コンセントレーターの使用方法
(1) コンデンサーの高さの調整。 平行光照射の場合、一般的なコンデンサーの焦点は上端のレンズ面中心から約1.25mm上にあります。 高倍率レンズやオイルレンズを使用する場合、倍率が大きいため鏡像の明るさが小さくなり、強い照明が必要になります。 したがって、コンデンサーの焦点がちょうど試料面に当たるように、コンデンサーを最高点まで上げる必要があります。 ただし、低倍率の対物レンズを使用する場合は、コンデンサーを適切に下げることができます。
(2) 可変絞りの使い方 可変絞りには 2 つの役割があります。 1 つは、標本に向けられる光束を制御することです。 もう一つはコンデンサーの開口数を変えることです。 2 つの役割のうち、後者の役割が支配的です。 対物レンズの分解能を最大限に活かすためには、原則としてコンデンサーの開口数と対物レンズの開口数を同じにする必要があります。 そうしないと、解像度や鮮明さが影響を受けます。
3. 照明方法
電気光源顕微鏡の場合、使用する際は光を適切な明るさに調整するだけです。 狙う必要はありません。 しかし、自然光を利用するローエンド顕微鏡の場合、良好な観察結果を得るには照明光を最大限に活用する必要があります。 したがって、顕微鏡検査の前に光を調整する必要があります。 ライトに向けるときは、低倍率レンズを光軸に向け、コンデンサーを適度に上げ、可変絞りを最大限に開きます。 次に、視野が最も明るく鮮明になるまで鏡を回転させながら接眼レンズを覗きます。 自然光を使用する場合は、窓枠や窓の外の木の枝の干渉を避けるようにしてください。
(4) 対物レンズの正しい焦点合わせ
照明が完了するか、適切な照明が調整されたら、鏡筒を上昇させるか、ステージを下降させ、試料スライドを移動体、つまり試料ホルダーに固定し、検査する部分を光穴の中心に移動します。ステージの。 それから焦点を合わせ始めます。
どのような検査を行う場合でも、まずは低倍率レンズから始めるべきです。 ピント合わせをするときは、まず粗動ハンドルを使って鏡筒を下げ、低倍ミラーの前玉とカバーガラスの距離が対物レンズの作動距離よりわずかに小さくなるようにします（5mm以下）。 対物レンズがスライドガラスを圧迫するのを避けるため、横から覗いてください。 次に、接眼レンズの視野を観察しながら、粗動ハンドルを使って鏡筒をゆっくりと上げます。 初めてオブジェクトの画像を見た後、微動ハンドルを使用して、オブジェクトの画像が最も鮮明になるまで焦点を微調整します。 低倍率対物レンズの視野が広く、標本全体の観察に適しています。 ムーバーを使用したり、ハンドホイールを垂直および水平に調整して、観察対象を見つけることもできます。 必要に応じて、見つかったターゲットを視野の中心に移動し、高倍率レンズ観察の準備が整います。
低倍率対物レンズから高倍率対物レンズへ変換する場合、対物レンズが顕微鏡に標準装備されており、使用するスライドガラスやカバーガラスが規格を満たしていれば、一般的に「等高変換」が可能です。 。 つまり、変換後、微調整ノブを少し調整するだけで、鮮明な画像が表示されます。 しかし、オイルレンズは同焦点性を主張しません。 切り替える前に鏡筒を上げ、最後に低倍率レンズのフォーカシング方法に従って再フォーカシングするのが最善です。
オイルレンズの使用方法は次のとおりです。まず鏡筒を上げ、標本スライドを取り外し、コンデンサーを少し下げ、コンデンサーのレンズに杉油を2滴垂らします（油中に気泡があってはならない）残っている場合は、小さな木の棒で取り除くことができます)、スライドガラスを元の位置に戻し、スライドガラスの底面が杉油に触れるようにコンデンサーを上げます。 こうしてコンデンサーの油浸が完了します。 次に、シダーオイルを 1 滴カバースリップ上に滴下しました。 次に横から覗いて、オイルレンズの前玉が杉油に浸かるまで（ただし、スライドガラスには接触していない）、粗調整を使って鏡筒をできるだけ下げ、油浸が完了します。対物レンズ。 次に、接眼レンズで観察しながら、視野内に最も鮮明な物体像が表示されるまで、マイクロハンドホイールを使用して鏡筒をゆっくりと上げます (方向を間違えてカバーガラスを押しつぶさないように注意してください)。
コンデンサーの油浸は、コンデンサーのレンズに直接オイルを滴下する代わりに、スライドを裏返してスライドの底面にオイルを滴下し、回転させてオイルを滴下する別の方法を採用することもできます。再度、位置を合わせて濃縮器の上に置き、濃縮器を持ち上げて濃縮器の油浸を完了します。 この方法はそれほどスムーズではありませんが、より安全です。 ガラス棒を使ってコンデンサーに直接接触させて杉油を塗布する人もいます。 この方法はレンズに傷がつきやすいため、使用しないでください。
オイルレンズを使用する場合、コンデンサーと標本の間に杉油を添加しないこともできます。つまり、コンデンサー上の媒体として空気が使用されますが、これにより対物レンズの解像度が犠牲になります。
オイルレンズ使用後、再度高倍率対物レンズに切り替えて観察する場合は、高倍率対物レンズの汚れを防ぐため、カバーガラスに付着したオイルを拭き取ってください。 ただし、絞りが適切に少し絞られていれば、濃縮器の油を拭き取る必要はありません。
オイルレンズを使用した後は、適時に杉油をきれいに拭き取る必要があります。 きれいなレンズ クリーニング ペーパーでレンズを 1 ～ 2 回拭くと、ほとんどの油分を拭き取ることができます。 次にキシレンを含ませたレンズティッシュで2回拭き、最後にレンズティッシュできれいに拭きます。 コンデンサーの掃除方法も同様です。 標本を保存する必要がある場合は、スライドガラス上の杉油を「紙を引っ張って」きれいに拭き取ることができます。 スライドガラスをレンズクリーニングペーパーで覆い、その上にキシレンを一滴落とし、濡れた状態でペーパーストリップをドラッグし、連続して数回拭きます。
最後に、焦点合わせプロセス全体 (特に高倍率対物レンズとオイル レンズの焦点合わせ) では、すべての動作をゆっくりと実行する必要があることを指摘します。 そうしないと、物体像が点滅してしまい、観察対象を見つけることができません。
