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実体顕微鏡の焦点一致性の判定方法

Jun 07, 2023

実体顕微鏡の焦点一致性の判定方法

 

顕微鏡で同じ深さで撮影した画像でも、領域が異なると解像度が異なります。 顕微鏡軸の位置を調整することにより、校正プレートのシーケンス画像が取得され、連結領域分割法を使用して校正プレートの画像が異なる深さで分割され、ドットの中心が抽出されます。 次に、焦点識別機能を使用してシーケンス画像内の各ドット領域に対応する最も明確な位置を取得し、鮮明度と深さの関係曲線を使用して深さ情報を取得し、深さ情報と平面情報を組み合わせて一連の明確な焦点を再構成します。面、つまり完全な焦点の面です。


実体顕微鏡の焦点一致性の判定原理
カメラ撮影では、物体距離u、像距離v、焦点距離fが式(1)を満たすとき、鮮明な画像が得られます。

 

顕微鏡で同じ深さで撮影した画像でも、領域が異なると解像度が異なります。 顕微鏡軸の位置を調整することにより、校正プレートのシーケンス画像が取得され、連結領域分割法を使用して校正プレートの画像が異なる深さで分割され、ドットの中心が抽出されます。 次に、焦点識別機能を使用してシーケンス画像内の各ドット領域に対応する最も明確な位置を取得し、鮮明度と深さの関係曲線を使用して深さ情報を取得し、深さ情報と平面情報を組み合わせて一連の明確な焦点を再構成します。面、つまり完全な焦点の面です。


実体顕微鏡の焦点一致性の判定原理
カメラ撮影では、物体距離u、像距離v、焦点距離fが式を満たすとき、鮮明な画像が得られます。


パラメータが変化すると、鮮明な像点が円形スポットになり、ぼやけた像が形成されます。円形スポットの半径を r、レンズの半径を T0、レンズからの距離を T0 とします。焦点面から焦点面までの距離は Av. 相似な三角形によって知識を知ることができます


実体顕微鏡結像の原理によれば、両眼結像面間の関係が両眼結像焦点面間の関係を決定することが知られている。 式(4)より、左右の結像面間の角度αとピント面の角度αには定性的な関係があることがわかり、左右のピント面の夾角は0。 実体顕微鏡の焦点の安定性を判断する指標として使用できます。 同時に、結像面間の角度に応じて左右の焦点面間の角度を調整することにより、左右の焦点面が可能な限り一致することが分かる。


実験プラットフォーム
実験プラットフォームは実体顕微鏡、精密移動式昇降プラットフォーム、コンピューターで構成されています。 実体顕微鏡はNOVEL OPTICSのNSZ{{0}}顕微鏡、左右のカメラ解像度は720×576ピクセル、ドットキャリブレーションプレートを測定サンプルとして使用し、ドット直径は25μm、間隔は100μmである。 ドット校正板は精密電子制御垂直昇降台(CHU0 SEIKI XA07A-R2H)上に設置されており、最小移動ステップは2mです。 昇降台は歩幅2mで等距離に移動するように制御され、歩幅ごとに写真が撮影され、合計117枚の画像が収集される。

 

2 Electronic Microscope

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