多光子レーザー走査型顕微鏡の長所と短所
多光子レーザー走査型顕微鏡は、レーザー走査型顕微鏡技術に基づいた実験方法であり、三次元観察においてより正確な光学的切断機能を提供します。 多光子蛍光励起法は、長波長の赤色光や近赤外光を利用して標本の高解像度の蛍光画像を収集するため、生体標本へのダメージが少なく、特に生体標本のような厚い生体組織の生細胞イメージングに適しています。脳のスライス、胚、臓器全体、さらには生物全体の画像研究。
利点は次のとおりです。
1. 赤色光または赤外光で励起されると、光の散乱が小さくなります（小さな粒子の散乱は波長の 4 乗に反比例します）。
2. ピンホールが不要となり、撮像部からの散乱光子をより多く収集できる。
3. ピンホールは非焦点領域または焦点領域から放出される散乱光子を区別できず、深層での多光子イメージングの信号対雑音比は良好です。
4. 単一光子励起に使用される紫外光または可視光は、ビームが焦点面に到達する前にサンプルによって吸収および減衰されやすいため、深層を励起するのは容易ではありません。
5. 生物顕微鏡観察においては、生物そのものの活性状態を損なわないこと、また水、イオン濃度、酸素、栄養素の循環が維持されることを第一に考えます。 光観察の場合、熱も光子エネルギーも細胞にダメージを与えない照射量と光エネルギー以内に収める必要があります。
6. 多光子顕微鏡には多くの利点もあります。 三次元分解能、深い侵入、散乱効率、背景光、信号対雑音比、制御など、レーザー顕微鏡にはない、あるいは過去に比類のない優れた特性があります。
多光子共焦点レーザー走査型顕微鏡は、さまざまな研究および応用分野に拡張されています。 自然状態のサンプルを三次元非破壊観察することができ、システムの分解能や信号対雑音比を向上させることができます。 多光子励起材料を利用することで、3次元高さデータ保存や3次元任意方向微細加工も実現でき、応用価値が高い。 多光子共焦点顕微鏡に関連する機械、材料、レーザー技術のさらなる発展により、光子共焦点レーザー走査型顕微鏡はさらに発展し、より幅広い用途が得られると考えられています。
デメリットは以下のとおりです。
1. 蛍光イメージングのみ。
2. サンプルに色素などの励起光を吸収する発色団が含まれている場合、サンプルは熱損傷を受ける可能性があります。
3. 解像度が若干低下します。 共焦点絞りを併用することで改善できますが、信号が失われてしまいます。
4. 高価な超高速レーザーには限界があるため、多光子走査型顕微鏡のコストは比較的高くなります。
