組織ブロックの体積に関する生物顕微鏡
生物顕微鏡検査 これまで、組織や細胞のX線マイクロセクションを作成するために、冷却固定、凍結超薄切片、凍結乾燥が一般的な方法でした。この方法の詳細は次のとおりです。
生物顕微鏡。コンデンサー付きの顕微鏡の場合、コンデンサーを上下に動かして適度な明るさを実現できます。また、可変発光ダイオードの絞りを変えて適度な9bの明るさを実現できます。光が明るい場合は、コンデンサーを適切に上げ、可変光の絞りを適切に拡大できます。光が強すぎる場合は、コンデンサーを適切に下げ、クロスライトビームの絞りを適切に減らすことができます。この状況でもまだ眩しいと感じる場合は、適切なフィルターを選択してコンデンサーの下のブラケットに配置できます。このようにして、満足のいく明るさを得ることができます。もちろん、コンデンサーの上下の位置を調整して可変の絞りサイズを実現し、適切なフィルターを選択する経験を積むには、ある程度の練習期間が必要です。
生物顕微鏡検査において非常に重要な問題は、細胞の収集と分離のプロセス中、凍結乾燥と樹脂包埋（FD）後、極薄ペレットの凍結後、凍結乾燥後に、各部分の65元素含有量を非常に注意深く分析する必要があり、分析対象の細胞を絶対に損傷しないことです。X線微小領域分析は多くの手順を伴うだけでなく、コストもかかります。長い時間と複数の手順を経て、分析された細胞が損傷した細胞または死んだ細胞である場合、誤った結論を導き出すのは残念です。たとえば、コラーゲナーゼ処理後に分離された心筋細胞には、長い棒状のものと丸いものの2つの形状があります。後者は、細胞分離中に損傷を受けた死にかけている細胞です。
生物顕微鏡検査 これら2種類の細胞の電解質の含有量と分布は非常に異なります。円形心筋細胞ではNaが非常に高く、Kが非常に低く、線状枝のCa濃度は非常に高くなっています。他の分析方法で調べたところ、円形細胞のNaが高くKが低いことと、ミトコンドリアのCaが高いのは、細胞分離プロセス中に細胞膜が損傷したためであることが証明されました。細胞や組織の冷固定方法は、多くの場合、最初に急冷して固定し、次に液体窒素で保存します。急冷と固定は保存効果にとって非常に重要です。生きた細胞や新鮮な組織は水分が豊富です。急冷すると、寒剤と直接接触する細胞や組織の部分（特に液体窒素で急冷する場合）が最初に凍結して固定され、「殻」が形成され、細胞の中心部が押しつぶされて冷固定されます。 そのため、X線微小領域分析を行うと、大きな細胞の中心部に氷の結晶があることがしばしば発見されます。これを防ぐために、液体窒素よりも融点が高く、乾燥度が低い-806cの物質を粉砕冷媒として使用します。このような物質は多数ありますが、最も手軽で安価なのは濃縮プロパン（沸点- 42.120c、融点- 187.10c、分子量44.1）であり、冷却速度も最も速いです。ただし、欠点は可燃性であることです。
生物顕微鏡は、筋繊維を専用のフレームに置くことができます。筋繊維の収縮が一定の段階に達して固定する必要がある場合、ノズルをすぐに始動して筋繊維に液体プロパンを噴射し、急冷して固定します。次に、筋繊維をフレームごと取り出し、液体窒素に入れます。血球または分離した細胞を固定する場合は、まず低速で遠心分離して細胞を濃縮し、細胞を熱伝導率の良い小さな銀管に移し、管を液体プロパンに入れて凍結して固定します。ホール研究室でラットの膵臓を固定する場合は、まず2つの鋼鉄ブロックを液体ヘリウム（または液体窒素）で予冷し、2つの銅ブロックをピンセットで挟み、膵臓の前後に置いて子宮腺を急冷して固定します。組織または細胞を急冷して固定してから、液体窒素に移して長期保存することができます。
