微生物数の測定 - 顕微鏡直接計数法!
基本的
顕微鏡直接計数法は、一定の面積と体積を備えた特殊なスライドガラス（バクテリアカウンターとも呼ばれます）上に、検査対象のサンプルの懸濁液を少量置き、その下で直接計数する、簡単、迅速、直感的な方法です。顕微鏡。 現在、国内外で一般的に使用されている細菌計数器には、血球計数盤、ペテロフ・ハウザー細菌計数器、ホークスレー細菌計数器などが含まれます。これらはすべて、酵母、細菌、カビの胞子などの懸濁液を計数するために使用できます。基本原則は同じです。 後者の 2 つの細菌計数器は、カバー ガラスで覆われた後の総体積が 0.02mm3 で、カバー ガラスとスライドの間の距離はわずか 0.02mm なので、次のような小さな細胞も検出できます。油浸対物レンズにより細菌の観察や計数が可能です。 これらのバクテリアカウンターを用いるほか、顕微鏡で塗抹標本面積と視野面積の比率を直接観察して推定する方法もあります。 この方法は一般に牛乳の細菌検査に使用されます。 顕微鏡直接計数法の利点は、直感的で高速かつ簡単に操作できることです。 ただし、この方法の欠点は、測定結果が通常、死んだ細菌と生きた細菌の合計になることです。 現在、この欠点を克服する方法として、生菌染色によるマイクロチャンバー培養（短時間）や細胞分裂阻害剤の添加など、生菌のみを計数するという目的を達成する方法が考えられています。
この実験では、血球計数器を例として顕微鏡下で直接計数を行いました。 他の2つの細菌計の使用方法については、各メーカーの説明書を参照してください。 血球計数器を使用した顕微鏡下での直接計数は、一般的に使用される微生物計数方法です。 計数盤は特別に作られたスライドガラスで、その上に 4 つのスロットが 3 つのプラットフォームを形成します。 中央の幅広のプラットフォームは短い水平スロットによって 2 つの半分に分割されており、プラットフォームの各側面には格子が並んでいます。 各グリッドは 9 つの大きな正方形に分割されており、中央の大きな正方形は計数室です。 計数室の規模には一般に 2 つの仕様があります。1 つは大きな正方形が 25 個の中の正方形に分割され、各中央の正方形が 16 個の小さな正方形に分割されることです。 もう 1 つは、大きな正方形が 16 個の中央の正方形に分割され、各中央の正方形が 25 個の小さな正方形に分割されますが、どのような種類のカウンティング ボードであっても、4 つの小さな正方形が存在します。00それぞれの大きな正方形。 大きな正方形の一辺の長さは 1 mm、大きな正方形の面積は 1 mm 2 です。カバー ガラスをかぶせた後のカバー ガラスとスライド ガラスの間の高さは 0.1 mm であるため、その体積は計数室の大きさは 0.1 mm (1 万分の 1 ミリリットル) です。
