マルチホトンレーザースキャン顕微鏡の利点を拡大して含める
レーザースキャンマルチホトン顕微鏡は、主に生細胞、固定細胞、および組織の深い構造を観察し、透明で鋭利な多層Zプレーン構造、すなわち光学スライスを得る能力に顕在化する光学顕微鏡の大幅な改善です。共焦点顕微鏡は、レーザー光源を使用して拡張され、目的レンズの焦点面全体を満たし、目的レンズのレンズシステムを介して試料の焦点面上の非常に小さなポイントに収束します。対物レンズの数値開口によれば、明るい照明点の直径は0。25-0。8μmであり、深さは0。共焦点のサイズは、顕微鏡の設計、レーザー波長、目的特性、スキャンユニット状態設定、および標本特性によって決定されます。フィールド顕微鏡の照明範囲と深さは大きく、共焦点顕微鏡の照明は焦点面の焦点に焦点を合わせています。共焦点顕微鏡の基本的な利点は、厚い蛍光標本（最大5 0μm以上）で厚い光学的切片を実行できることです。厚さは約0.5〜1.5μmです。一連の光学スライス画像は、顕微鏡のZ軸ステッパーモーターを使用して標本を上下に移動することで取得できます。画像情報の収集は、標本上の他の位置から放出される信号からの干渉なしに、 * *平面内で制御されます。バックグラウンド蛍光の影響を除去し、信号対雑音比を増加させた後、共焦点画像のコントラストと解像度は、従来の野外照明蛍光画像と比較して大幅に改善されます。多くの標本では、複雑な構造コンポーネントが織り交ぜて複雑なシステムを形成しますが、十分な光学セクションを収集できると、ソフトウェアを使用して3次元でそれらを再構築できます。この実験方法は、細胞または組織間の複雑な構造的および機能的関係を解明するために、生物学的研究で広く使用されています。
