蛍光顕微鏡と通常の光学顕微鏡の違いと特徴
蛍光顕微鏡と通常の光学顕微鏡の違いは、通常の光源の照明によって標本を観察するのではなく、特定の波長の光（通常は紫外線、青紫色光）を使用して顕微鏡下の標本内の蛍光物質を励起することです。そのため、蛍光顕微鏡の光源の蛍光は直接照明の役割を果たしているわけではなく、標本内の蛍光物質の一種の励起エネルギー源として機能します。標本を観察できるのは、光源の照明によるものではなく、標本内の蛍光物質が励起光エネルギーを吸収した後に現れる蛍光現象によるものです。蛍光顕微鏡の特徴は、主にその光源が特定の波長範囲の励起光を大量に供給できるため、検査する標本内の蛍光物質が必要な励起光の強度を得ることができることです。同時に、蛍光顕微鏡には対応するフィルターシステムが必要です。蛍光顕微鏡は、蛍光組織化学の基本的なツールです。 超高圧光源、フィルターシステム（励起および抑制フィルタープレートを含む）、光学系、撮影システムなどの主要コンポーネントで構成され、特定の波長の光を使用して標本を刺激し、蛍光を発します。
1. 蛍光励起の方法：光の波長範囲によって、UV励起法（紫外線照明を使用）とBV励起法（青紫色光を使用）に分けられます。2種類のUV励起法は、励起に400nmより短い近紫外線を使用します。この方法では可視励起光がないため、観察される蛍光は染料の固有の蛍光を示し、標本上の特定の蛍光と背景組織の自己蛍光を区別することが容易です。
2. BV励起法：励起には紫外線から青色光までの404nm、434nmを中心とした方法。この方法では青色光を使用して標本に照射するため、蛍光観察システムのカットオフフィルターは、青色光を完全に遮断し、目的の緑色と黄色の蛍光を十分に通過できるフィルターを使用する必要があります。蛍光抗体法の蛍光色素。励起光の最大吸収波長と蛍光の最大発光波長が近いため、BV励起法で使用するフィルターはシャープなカットオフフィルターである必要があります。この方法では励起光として青色光を使用するため、蛍光色素の吸収効率が高く、より明るい画像が得られます。欠点は、500nm以下の蛍光が見えず、500nmを超えると画像全体が黄色く見えることです。蛍光抗体法では、特異性の大部分を蛍光色素の固有の色で判断するため、微妙な特異性を議論する際には、前述のBV励起法の欠点が非常に影響する傾向があります。
