顕微鏡の視野面積を計算する方法

顕微鏡の視野面積を計算する方法

顕微鏡で病理学的フィルムを読み取ることは、病理学者の仕事の重要な側面の1つです。顕微鏡観察と記録の結果は、臨床診断の科学的根拠です。顕微鏡を正しく標準的に使用することによってのみ、読み取り結果の観察と記録は科学的になります。ご存知のように、顕微鏡の撮像は、まず対物レンズで拡大して標本を撮像し、次に接眼レンズで拡大して肉眼で観察します。表示できる画像の視野は、接眼レンズの視野数によって決まります。この記事で説明する観察と記録は、接眼レンズを介して顕微鏡で観察および記録することに基づいていることに注意してください。接眼レンズを介して観察しない他の光路は、CCD、デジタルカメラ、画像を収集するためのソフトウェア操作など、画像を収集して記録するために使用されます。これについては別途説明します。顕微鏡の接眼レンズの視野数（FN）が異なり、顕微鏡下で見ることができる視野のサイズが異なります。異なる領域領域は、顕微鏡下での陽性率カウントに影響を与えます。 接眼レンズの視野数と視野面積の関係を理解し​​ておく必要があります。視野数が小さいほど、可視視野面積は小さくなり、逆に視野数が大きいほど、可視視野面積は大きくなります。

1 接眼レンズの視野数の識別
顕微鏡の設計と製造は国際標準に準拠しています。顕微鏡の接眼レンズには視野番号が記されています。たとえば、オリンパス BX50 顕微鏡の接眼レンズ視野番号は 22 です (22 の前の英語と数字は接眼レンズの分類名と倍率です)。

2 実際の視野と計算式
標本の平面上において、顕微鏡が観察できる範囲（円形の領域）を実視野、または視野ともいいます。領域の大きさを計算するには、次の式を使用します。

3 対物レンズ倍率
対物レンズは、顕微鏡画像化に使用される重要な光学部品です。生物顕微鏡で一般的に使用される対物レンズの倍率は、4、10、20、40、100 です。病理学的計数に一般的に使用される高倍率対物レンズは 40 です。

4 中間倍率
中間倍率を考慮する必要はなく、接眼レンズを通して直接観察します。中間倍率とは、光路に追加された CCD インターフェイス、写真接眼レンズ、CCD 要素の倍率を指します。現在使用されている顕微鏡のほとんどは無限遠イメージング システムであり、蛍光観察、局所差分観察、微分干渉観察などが追加されているため、コンポーネントによって倍率が変わることはなく、考慮する必要はありません。

5 一般的に使用される接眼レンズの視野範囲
最も一般的に使用されている接眼レンズの視野数は 22 です。さまざまな顕微鏡メーカーが、視野数 25 の広視野接眼レンズや、視野数 265 の超広視野接眼レンズを次々と設計・製造してきました。視野数が 18 や 20 と小さい接眼レンズもあります。