微生物の顕微直接計数法
顕微鏡下で血球計数器を使用して直接計数することは、微生物を計数するための一般的な方法です。この方法は、直観的かつ迅速であるという利点を備えています。適切に希釈された細菌懸濁液 (または胞子懸濁液) が、顕微鏡による計数のために血球計算板のスライドとカバースリップの間の計数チャンバーにロードされます。計数室の容積は固定（0.1 mm3）であるため、顕微鏡で観察される微生物の数に基づいて、単位容積あたりの微生物の総数を計算できます。この方法は、生きている微生物細胞と死んだ微生物細胞の両方をカウントするため、トータルカウント方法としても知られています。
血球計数器は、4 つの溝によって形成された 3 つのプラットフォームで構成される特別なガラス スライドです。中央のプラットフォームは横溝によってさらに 2 つの半分に分割されます。プラットフォームの各半分にはグリッドがエッチングされています。各グリッドは 9 つの大きな正方形に分割されており、中央の大きな正方形は微生物の計数が実行される計数室として機能します。血球計数器の構造を図Ⅷ‑1に示します。
計数室の目盛り仕様には一般的に 2 つのタイプがあります。 1 つのタイプでは、大きな正方形が 16 個の中正方形に分割され、各中正方形がさらに 25 個の小さな正方形に分割されます (図 Ⅷ‑2)。もう 1 つのタイプは、大きな正方形が 25 個の中正方形に分割され、各中正方形が 16 個の小さな正方形に細分されます (図 Ⅷ‑1C)。計数室の仕様に関係なく、各大きな正方形内の小さな正方形の総数は変わりません。図 Ⅷ‑2 に示すように、16 × 25=400 個の小さな正方形になります。
それぞれの大きな正方形の一辺の長さは 1 mm、面積は 1 mm² になります。カバースリップを配置した後、スライドとカバースリップの間の高さは 0.1 になります。
mm;したがって、計数室の容積は 0.1 mm3 です。
計数は、通常、５つの中正方形内の微生物の総数を計数する。次に、各中正方形の平均値が計算され、16 または 25 倍されて、1 つの大きな正方形内の合計数が得られます。最後に、この値は 1 mL の細菌懸濁液中の微生物の総数に変換されます。
