PH メーター - 培地の pH の測定と調整
すべての微生物は、それらが生息する環境の pH の影響を受けます。 多くの場合、選択種の存在により、それらが生育する pH 範囲が狭まります。 場合によっては、培地の酸性またはアルカリ性も増殖選択因子として機能することがあります。 ただし、生化学試験培地の場合、基質中で微生物がtk活性を示すpH範囲は生育に必要なpH範囲より狭いため、培地のpHを予想範囲に調整することが重要です。 研究室が培地組成に従って培地を調製するときは、pH を確認して調整する必要があります。 メーカーが提供する既製の合成脱水培地であっても(特に一部のストック脱水培地)、実験培地を作成した後に最終 pH を測定する必要があることに注意しなければなりません。
媒体の pH を測定する最も正確な方法は、pH メーターを使用することです。 使用前に、既知の pH (通常 pH 4 ~ 7) の標準緩衝液で校正する必要があります。 pH 計の電極を蒸留水ですすぎ、ビーカー内の培地に浸漬し、pH 計の目盛から培地の pH を読み取ります。 各メーカーは、各タイプの pH メーターの詳細な操作説明書を提供しています。
培地を調製する際、機械的に撹拌しながらpHメーターを使用することにより、容易にPHを調整することができます。 培地は、継続的に撹拌できる容器(大型ビーカーなど)に準備してください。 またはテフロン加工された磁石。 寒天含有培地の pH は解凍後に調整する必要がありますが、加熱可能なマグネチックスターラーを使用すると簡単に調整できます。 pH を調整する場合は、まず pH が既知の標準緩衝液を使用して pH メーターを校正します。 次に、複合電極と抵抗温度計 (存在する場合) を培地に置き、適量の塩酸と水酸化ナトリウムを電極から離れたビーカーの端からゆっくりと加え、培地が必要な pH に達して維持できるようにします。
pH メーターの温度補正では、電極システムに対する温度の影響を考慮する必要があります。一部の希釈液や媒体では、pH は温度によって大幅に変化します。 液体培地および希釈液の場合、通常、pH は 25 度または使用温度で調整および測定できます。
寒天培地のpHは溶解後に調整する必要があり、溶解温度は45度以上となるため、固体培地のpHは使用温度で決定する必要があります。 このとき、平頭複合電極を使用し、pH 計の温度補正を手動で校正する必要があります。 培地を調製する際に、培地のpHが溶融状態と凝固状態とで異なると判断された場合には、pHの調整に誤りがあることを意味する。
同様に、調製した培地を加熱滅菌(オートクレーブなど)すると、pH 変化が生じる可能性があります。 脱水培地の場合はメーカーがこの点を考慮しており、通常pH調整の必要はありませんが、使用する培地のpHをよく確認してください。 再溶解または調製中に脱水寒天培地の pH を調整する必要がある場合は、培地の過熱を避けるために、滅菌工程後に濾過滅菌した塩酸と水酸化ナトリウム溶液で調整するのが最善です。 異なる原材料または医薬品を使用して培地を調製する場合、オートクレーブ処理後に培地の pH を確認する必要があります。 さらに、各オートクレーブ後の培地の pH が同様に変化することが判明した場合は、培地を調製するときに pH を適切に調整できます。 ただし、滅菌後の培地の最終 pH を決定する必要があります。






