暗視野顕微鏡の原理と用途

暗視野顕微鏡の原理と用途

暗視野顕微鏡（ダークフィールド顕微鏡）は、集光レンズを遮光シートの中央に配置し、照明光が直接鏡像に入らず、標本で反射して回折した光だけが対物レンズに入るようにします。そのため、視野の背景は黒く、物体の端は明るくなります。この顕微鏡を使用すると、4〜200nmの微粒子を見ることができ、解像度は通常の顕微鏡の50倍になります。暗視野顕微鏡の原理と用途：

1、原理：暗視野顕微鏡は、ティンダル（Tyndall）の光学効果の原理を利用したもので、通常の光学顕微鏡の構造の転換に基づいています。暗視野集光器は、光源の中心ビームを遮断します。試料の下から上に向かって対物レンズに入ることができません。そのため、光の経路が変わり、試料を観察する際に斜めに照射され、試料が反射または散乱した光に遭遇し、散乱した光が対物レンズに入るため、視野全体が暗くなります。

2、適用範囲：暗視野顕微鏡は、染色されていない透明なサンプルを観察するためによく使用されます。これらのサンプルは、周囲の屈折率と似ているため、一般的な明視野でははっきりと見えにくいため、暗視野を使用してサンプル自体と背景のコントラストを向上させます。この種の顕微鏡は、4〜200nmの小さな微粒子を見ることができ、物体の存在、動き、表面特性しか見ることができませんが、物体の微細構造を識別することはできません。

3、使用方法
（１）暗視野スポッターを顕微鏡のスポッターホルダーに取り付けます。

（２）強い光源を選びますが、対物レンズに直接光が入らないようにするため、通常は顕微鏡のランプで照らします。

（３）集光器と標本片の間に杉油を一滴垂らす。集光器内の照明光が全反射以上になって検査対象物に届かず、暗視野照明にならないようにするためである。

（４）集光鏡を上下させ、集光鏡の焦点を検査対象物、すなわち検査対象物の円錐ビーム照射の頂点に合わせる。集光鏡を水平方向に移動でき、中心調整装置が付いている場合は、集光鏡の光軸と顕微鏡の光軸が厳密に一直線になるように、まず中心調整を行う。

（５）集光器に対応した対物レンズを選択し、焦点距離を調整して観察対象物を探します。