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顕微鏡観察の3つの種類

Apr 28, 2024

顕微鏡観察の3つの種類

 

I. 明視野BF(明視野BF)
明視野 BF は顕微鏡の一般的な観察法であり、病理学や検査で染色切片を観察するために広く使用されており、すべての顕微鏡でこの機能を実行できます。


明視野


II. ダークフィールドDF(ダークフィールドDF)
暗視野 DF は、実際には暗視野照明です。明視野とは異なり、照明された光を直接観察するのではなく、検査対象物から反射または回折された光を観察します。その結果、視野は暗い背景になり、検査対象物は明るい画像として表示されます。


暗視野の原理は光学におけるチンダル現象に基づいており、強い光が直接当たった場合、塵埃は人間の目には観察できませんが、これは周囲の強い光が原因です。光が斜めに向けられると、粒子は光の反射によりサイズが大きくなって人間の目に見えるようになります。


暗視野観察に必要な特別な付属品は暗視野スポッティングスコープです。これは、光線が検査対象を下から上へ通過するのではなく、光線の経路を検査対象に向かって斜めに向けるように変更することで、照明光が直接対物レンズに入らず、検査対象の表面からの反射光または回折光を利用して明るい画像を形成するという特徴があります。暗視野観察の解像度は明視野観察よりもはるかに高く、*最大 0.02-0.004 です。

ダークフィールド


III. 位相差PH
光学顕微鏡の発展において、位相差PHの発明成功は現代の顕微鏡技術における重要な成果です。ご存知のように、人間の目は光波の波長(色)と振幅(明るさ)しか区別できません。無色で明るい生物標本の場合、光が通過しても波長と振幅はあまり変化せず、明視野観察で標本を観察することは困難です。


位相差顕微鏡は、検査対象の光範囲の差を利用して顕微鏡検査を行います。つまり、光の干渉現象を効果的に利用して、人間の目では区別できない位相差を区別できる振幅差に変換し、無色透明の物質でもはっきりと見えるようになります。これにより、生きた細胞の観察が大幅に容易になるため、位相差顕微鏡は倒立顕微鏡で広く使用されています。


位相差顕微鏡の基本原理は、標本を透過した可視光の光学距離の差が振幅の差に変換され、さまざまな構造間のコントラストが高まり、可視化されることです。光は標本を通過して屈折し、元の光路から外れ、1/4λ(波長)だけ遅延します。1/4λがさらに増加または減少すると、光学距離の差は1/2λになり、2つの光合成ビームの軸が干渉した後、2つの光合成ビーム間の干渉が強化され、振幅が増加または減少して、コントラストが向上します。構造上、位相差顕微鏡には、通常の光学顕微鏡とは異なる2つの特別な機能があります。


1. 環状絞り(アニュラーダイヤフラム)は光源とコンデンサーの間に位置し、コンデンサーを通過する光を中空の光錐に形成し、標本に焦点を合わせる役割を果たします。


2. 位相板(環状位相板)対物レンズにフッ化マグネシウム位相板をコーティングし、直接光または回折光の位相を1/4λ遅らせることができます。2種類あります。


1.位相板:直接光を1/4λ遅延させ、2群の光波が同軸光波に加算され、振幅が増加し、試料の構造が周囲の媒体よりも明るくなり、明るいコントラスト(または負のコントラスト)が形成されます。


2.B 位相板: 回折光は 1/4 λ 遅延され、2 つの光波群が合流した後の光波軸が減少し、振幅が小さくなり、暗いコントラスト (または正のコントラスト) が形成され、周囲の媒体よりも暗い構造になります。

 

4 Microscope

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