一般的な 2 つの顕微鏡観察方法
1. 暗視野観察
暗視野観察では暗視野照明を使用します。明視野観察とは異なり、照明光を直接見ることはできません。試料によって反射または回折された光のみが検出されます。その結果、視野の背景は暗くなり、標本は明るく見えます。
暗視野観察は光学におけるチンダル効果に基づいています。塵の粒子は、光の回折により、直接強い光の下では人間の目には見えません。光が粒子に斜めに当たると、光の反射により粒子が拡大して見えるようになります。
暗視野観察に必要な特別なアクセサリは暗視野コンデンサーです。光線が試料を垂直に上に通過するのを防ぎます。代わりに、光の方向を変えて、斜めの角度で標本を照射します。照明光は対物レンズに直接入射せず、試料表面からの反射光や回折光によって明るい像を形成します。暗視野観察の分解能は明視野観察に比べてはるかに高く、0.02～0.004μmに達します。
2. 位相差顕微鏡検査
光学顕微鏡の発展において、位相差顕微鏡の発明は現代の顕微鏡における大きな成果を表しています。人間の目は、光波の波長（色）と振幅（明るさ）のみを区別できます。無色透明の生体標本の場合、光は波長や振幅の変化がほとんどなく透過するため、明視野条件下での観察が困難になります。
位相差顕微鏡では、試料の光路差に基づいて検査を行います。光の干渉を効果的に利用して、位相差 (人間の目には見えない) を識別可能な振幅差に変換します。無色透明の物質も鮮明に可視化できます。これにより生きた細胞の観察が大幅に容易になるため、位相差顕微鏡は倒立顕微鏡とともに広く使用されています。
位相差顕微鏡の基本原理は、標本を透過した可視光の光路差を振幅差に変換することで、異なる構造間のコントラストを向上させ、鮮明に見えるようにすることです。試料を通過した後、光は屈折して元の経路から外れ、波長の 1/4 だけ遅れます。追加の遅延または 1/4 波長の進みにより、合計の光路差は 1/2 波長になります。 2 つのビームは重ね合わされて干渉し、振幅を増減してコントラストを高めます。位相差顕微鏡には、構造的に通常の光学顕微鏡とは異なる 2 つの特別な特徴があります。
