顕微鏡油浸対物レンズの使用
(1) まず、乾燥した対物レンズで標本の大まかな輪郭を観察します。
(2) 高倍率の乾式対物レンズに切り替え、試料の対象部分を視野の中心に移動します。
(3) 鏡筒を約 1.5 cm 上げ、油浸対物レンズを作業位置まで回転させます。
(4) シダーオイル (またはパラフィンオイル) をカバースリップの観察する領域に少量滴下します。 NA > 1.0 の液浸対物レンズまたは暗視野照明下では、コンデンサーにもオイルを追加する必要があります (このステップは通常省略されます)。
(5) 粗動ネジを慎重に回し、鏡筒をゆっくりと下げます。対物レンズの先端と試料の間の隙間を注意深く観察してください。まず対物レンズの前端を油滴に接触させ、次に対物レンズの先端がカバースリップに近づくまでチューブをゆっくりと下げ続けます (触れないでください)。このステップでは、試料を潰したり、油浸対物レンズを損傷したりしないように細心の注意を払ってください (油浸対物レンズの作動距離はわずか約 0.2 mm です)。
(6) 接眼レンズをのぞき、焦点細ネジを回して、標本にはっきりと焦点が合うまで鏡筒をゆっくりと上げます。ファインフォーカスネジを逆回転させて試料を潰さないように注意してください。
(7) 鮮明な画像が得られたら、接眼レンズを取り外し、鏡筒を真下から覗いてください。コンデンサーの虹彩絞りを閉じてから、その絞りが視野のサイズと一致するまでゆっくりと開き、コンデンサーの絞りが対物レンズの絞りと一致するようにします。コンデンサーの口径が対物レンズの口径より小さいと、対物レンズの性能を十分に発揮できません。
(8) 観察後は鏡筒を 1cm 上げ、油浸対物レンズを光軸から遠ざけて速やかに清掃してください。最初にレンズペーパーで大部分の油分を拭き取ります。次に、キシレンで湿らせたレンズペーパーで 2 回拭き、続いて乾いたレンズペーパーで拭きます。直径に沿ってまっすぐに拭きます。レンズの周りを円を描くように拭かないでください。優しく軽い動きで、強く押さないでください。コンデンサーに油が付着した場合も同様に清掃してください。カバースリップ上の油の場合は、「プルオフ法」を使用します。小さなレンズペーパーをカバースリップ上の油滴の上に置き、紙の上にキシレンを一滴加え、紙を外側に引っ張ります。 3～4回繰り返して掃除してください。 (パラフィンオイルを使用する場合は、最初にキシレンを使用せずに乾いたレンズペーパーで洗浄します。キシレンは実験後にのみ使用してください。)
(9) コンデンサーを約 1 cm 下げ、ステージ上のスライドガラスを適切な位置に移動します。
