倒立顕微鏡と蛍光顕微鏡のどちらを選択すればよいですか?
顕微鏡は、細胞培養および関連する派生実験において重要な機器です。現在、さまざまなタイプの顕微鏡が市販されており、ニーズに合った適切な顕微鏡を選択するのは困難です。ここでは、誰もが選択できる倒立顕微鏡と蛍光顕微鏡の原理を紹介します。
倒立顕微鏡は通常の顕微鏡と同様に、主に機械部、照明部、光学部の3つの部分で構成されています。倒立顕微鏡の構成は通常の正立顕微鏡と同じですが、対物レンズと照明系が逆になり、前者がステージの下に、後者がステージの上に配置されます。この構造により、照明スポットライトシステムとステージ間の有効距離が大幅に広がり、培養皿や細胞培養ボトルなどの厚みのある観察器具（もちろんスライドガラスも使用可能）の設置が容易になり、また、ステージ間の作動距離も長くなります。対物レンズと材料はそれほど大きくする必要はありません。倒立顕微鏡は、微生物、細胞、細菌、組織培養物、懸濁液、沈殿物などを観察するために医療機関、保健機関、大学、研究機関で使用されています。培地中での細胞や細菌の増殖と分裂のプロセスを連続的に観察でき、このプロセスのあらゆる形式をキャプチャできます。細胞学、寄生虫学、腫瘍学、免疫学、遺伝子工学、産業微生物学、植物学などの分野で広く使用されています。
蛍光顕微鏡は、細胞内の物質の吸収、輸送、分布、局在を研究するために使用されます。検査対象物に対して蛍光を発生させる方法には 2 通りあります。1 つは紫外線照射によって直接発せられる自然蛍光です。二次蛍光は、観察対象物が蛍光染料で処理され、蛍光を発する前に紫外線にさらされると発生します。クロロフィルなどの細胞内の一部の物質は、紫外線にさらされると自発蛍光を発します。物質自体は蛍光を発しない場合もありますが、蛍光色素や蛍光抗体で染色すると、紫外線照射により二次蛍光を発することがあります。蛍光顕微鏡は、発光効率の高い点光源を使用し、カラーフィルターシステムを介して特定の波長の光（UV 365nmまたはUV Blue 420nm）を励起光として放射し、サンプル中の蛍光物質を励起してさまざまな色の蛍光を発します。その後、対物レンズと接眼レンズを拡大して観察します。このようにして、たとえ弱い蛍光であっても、強いコントラストの背景の下で容易に認識でき、高感度になります。主に細胞の構造、機能、化学組成を研究するために使用されます。
蛍光顕微鏡は透過型と落射型の2種類に分けられます。前者はより原始的であり、後者はより高度です。 2 種類の蛍光顕微鏡の基本的な構成は似ていますが、主な違いは、透過した励起光が標本を通過し、全体として蛍光を発することです。蛍光は対物レンズに入り、倍率が高くなるほど蛍光は弱くなります。落ちてくる励起光は標本の表面に投射され、蛍光が発生し、対物レンズに入ります。倍率が高くなるほど蛍光が強くなるため、高倍率観察に適しています。蛍光顕微鏡の主な構成要素は、水銀ランプ光源、励起フィルター板、分光光度計（滴下型）、抑制フィルター板、暗視野コンデンサー（透過型）です。また、水銀ランプは加熱が激しいため、ほとんどのランプには熱吸収フィルターが装備されています。一部の蛍光顕微鏡には位相差対物レンズと円形絞りが備わっており、位相差観察が可能です。蛍光顕微鏡には倒立構造を採用した倒立顕微鏡などもあります。
さらに、上記の顕微鏡は、顕微鏡で見た物理的な画像をデジタルアナログ画像に変換し、コンピュータ上で画像化するCCDを取り付けることによってデジタル顕微鏡として組み立てることができます。これにより、ミクロ分野の研究を従来の双眼観察からディスプレイによる再現に移行することができ、作業効率が向上します。
