多光子レーザー走査顕微鏡の長所と短所の紹介
1. 赤色光または赤外線を使用して励起すると、光の散乱が小さくなり、小さな粒子の散乱は波長の 4 乗に反比例します。
2. ピンホールを必要とせずに、イメージング断面からより多くの散乱光子を収集できます。
3. ピンホールは焦点が合っていない領域または焦点領域から放出された散乱光子を区別することができず、深層における多光子イメージングの信号対雑音比は良好です。
4. 単一光子励起に使用される紫外線または可視光は、ビームが焦点面に到達する前にサンプルによって容易に吸収され減衰するため、深層を励起することが困難です。
5. 生物顕微鏡観察では、生物自体の活動状態を損なわず、水、イオン濃度、酸素、栄養素の流れを維持することを第一に考えます。光観察の場合、熱と光子エネルギーの両方が、細胞が損傷しない照射量と光エネルギー内に収まる必要があります。
6. 多光子顕微鏡には、3次元解像度、深度浸透、散乱効率、背景光、信号対雑音比、制御など、多くの利点があり、これらはすべて、以前のレーザー顕微鏡にはなかった、または比較できなかった特性を備えています。
多光子レーザー走査顕微鏡の欠点:
1. 蛍光のみを撮影できます。
2. サンプルに励起光を吸収する発色団が含まれている場合、サンプルが熱的に損傷を受ける可能性があります。
3. 解像度が若干低下します。共焦点穴を同時に使用することで改善できますが、信号損失があります。
4. 高価な超高速レーザーによって制限されるため、多光子走査顕微鏡のコストは比較的高くなります。
