蛍光顕微鏡の原理と構造的特徴

蛍光顕微鏡の原理と構造的特徴

蛍光顕微鏡は、高発光効率の点を利用し、フィルターカラーシステムを介して特定の波長の光（紫外線3650nmまたは青紫4200nmなど）を励起光として放出し、標本内の蛍光物質を励起してさまざまな色の蛍光を放出し、対物レンズと接眼レンズを通して拡大して観察します。このように、強いコントラストの背景でも、蛍光が非常に弱い場合でも識別しやすく、感度が高く、主に細胞の構造と機能、化学組成の研究に使用されます。蛍光顕微鏡の基本構造は、通常の光学顕微鏡といくつかの付属品（蛍光光源、励起フィルター、2色ビームセパレーター、ブロッキングフィルターなど）で構成されています。 蛍光光源 - 一般的に使用される超高圧水銀ランプ（50-200W）は、さまざまな波長の光を放出できますが、各蛍光物質には最も強い蛍光励起波長があるため、励起フィルター（通常は紫外線、紫、青、緑の励起フィルター）を追加して、特定の波長の励起光だけが試料を通過させ、他の光は吸収されるようにする必要があります。 そのため、励起フィルター（通常は紫外線、紫、青、緑の励起フィルター）を追加して、特定の波長の励起光だけが試料を通過させ、他の光は吸収されるようにする必要があります。 各物質に励起光が照射されると、非常に短い時間内に照射光よりも長い波長の可視蛍光を放出します。 蛍光には特異性があり、通常は励起光よりも弱いため、特定の蛍光を観察できるようにするには、使用する対物レンズの後ろにブロッキング（または抑制）を追加する必要があります。

蛍光顕微鏡と通常の顕微鏡の違い

1. 照明方法は通常、落下式、つまり光源が対物レンズを通してサンプルに投影されます。

2. 光源は紫外線であり、通常の顕微鏡よりも波長が短く、分解能が高い。

3. 特殊なフィルターが 2 つあり、光源の前にあるフィルターは可視光をフィルタリングするために使用され、接眼レンズと対物レンズの間にあるフィルターは紫外線をフィルタリングして人間の目を保護します。

蛍光顕微鏡も光学顕微鏡の一種ですが、主な違いは、両者の励起波長が異なることです。これにより、蛍光顕微鏡と通常の光学顕微鏡の構造と使用方法が異なります。

蛍光顕微鏡は、免疫蛍光細胞化学の基本的なツールです。光源、フィルタープレートシステム、光学系などの主要コンポーネントで構成されています。特定の波長の光を使用して標本を刺激して蛍光を発させ、対物レンズと接眼レンズシステムを介して拡大し、標本の蛍光画像を観察します。