蛍光顕微鏡の技術的パラメータ 蛍光顕微鏡の技術と方法
蛍光顕微鏡の技術パラメータ 1. 広角接眼レンズ 2. アクロマート対物レンズ 3. 4 穴対物レンズコンバーター 4. 落射蛍光装置 青 (B) 緑 (G) 励起システム 100W 水銀ランプ 5.同軸粗微焦点調整機構：調整 焦点範囲：15mm 微動グリッド値：0.002mm 6. 二層メカニカルテーブル 縦方向移動範囲：70mm 横方向移動範囲：50mm
蛍光顕微鏡の技術パラメータ
1.広角接眼レンズ
2. アクロマート対物レンズ
3. 4 穴ノーズピース
4. 落射蛍光装置 青(B) 緑(G) 励起方式 100W水銀ランプ
5. 同軸粗微焦点調整機構: 焦点範囲 15mm 微動グリッド値 0.002mm
6. 二層機械作業台
上下移動範囲：70mm 横移動範囲：50mm
蛍光顕微鏡のスキルと方法
(1) スライドガラス
スライド ガラスの厚さは 0.8 ～ 1.2 mm である必要があります。 スライドが厚すぎると、一方でより多くの光が吸収され、他方では、励起光を標本に集中させることができなくなります。 スライドは滑らかで、厚さが均一で、明らかな自家蛍光があってはなりません。 石英ガラスのスライドが使用されることもあります。
(2) カバーガラス
カバーガラスの厚さは約0.17mmで、滑らかです。 励起光を強化するために、干渉カバー ガラスを使用することもできます。これは、異なる波長の光に対して異なる干渉効果を持つ物質 (フッ化マグネシウムなど) の複数の層でコーティングされた特殊なカバー ガラスです。蛍光もスムーズに進みます。 励起光は透過および反射され、この反射した励起光が試料を励起する。
(3) 標本
組織切片やその他の標本は厚すぎてはいけません。 厚すぎると、励起光の大部分が試料の下部で消費され、対物レンズで直接観察される上部が完全に励起されなくなります。 また、セルの重なりや不純物カバーなども判定に影響します。
(4) 封入剤
グリセリンは封入剤として一般的に使用されますが、自家蛍光がなく、無色透明である必要があり、蛍光の明るさは pH 8.5-9.5 でより明るく、すぐに色あせしにくいです。 したがって、グリセロールとpH 9.0〜9.5の0.5mol/l炭酸緩衝液の等量混合物がマウント剤として一般的に使用されます。
(5)ミラーオイル
一般に、暗視野蛍光顕微鏡や油浸イマージョンレンズで標本を観察する場合には、イマージョンオイルを使用する必要があります。 特別な無蛍光イマージョンオイルを使用するのが最善です。 上記のグリセリンでも代用できますし、流動パラフィンも使用できますが、屈折率が低いため画質への影響は若干あります。 影響。
蛍光顕微鏡の原理と構造の特徴
蛍光顕微鏡では、発光効率の高い点からフィルターシステムを通した特定の波長の光（紫外光3650インチや紫青色光4200インチなど）を励起光として照射し、標本中の蛍光物質を励起して蛍光を発します。さまざまな色を観察します。その後、対物レンズと接眼レンズを拡大して観察します。 このように、強いコントラストの背景の下では、蛍光が非常に弱い場合でも、識別が容易であり、感度が高くなります。 主に細胞の構造と機能、化学組成の研究に使用されます。 蛍光顕微鏡の基本構成は、通常の光学顕微鏡にいくつかの付属品（蛍光光源、励起フィルター、2色ビームスプリッター、ブロッキングフィルターなど）を加えたものです。 蛍光光源 - 一般的に超高圧水銀ランプ（50-200W）が使用され、さまざまな波長の光を放射できますが、各蛍光物質には最も強い蛍光を発する励起波長があるため、励起フィルター（一般的には、紫外、紫、青、緑の励起フィルターがあります)。特定の波長の励起光のみを通過させて試料に照射し、他の光を吸収します。 各物質は励起光を照射されると、ごく短時間のうちに照射波長よりも長波長の可視蛍光を発します。 蛍光は特異的であり、一般に励起光よりも弱いです。 特定の蛍光を観察するには、対物レンズの後ろにブロッキング（または抑制）を追加し、それと組み合わせて使用する必要があります。
蛍光顕微鏡と通常の顕微鏡の違い
1. 照明方法は通常、落射法です。つまり、光源が対物レンズを通してサンプルに投影されます。
2.光源は紫外光であり、通常の顕微鏡よりも波長が短く、解像度が高い。
3. 2 つの特別なフィルターがあり、光源の前にあるフィルターは可視光を除去するために使用され、接眼レンズと対物レンズの間にあるフィルターは人間の目を保護するために紫外線を除去するために使用されます。
蛍光顕微鏡も光学顕微鏡の一種ですが、主な違いは両者の励起波長が異なることです。 これにより、蛍光顕微鏡と通常の光学顕微鏡との構造や使い方の違いが決まります。
蛍光顕微鏡検査は、免疫蛍光細胞化学において不可欠なツールです。 光源、フィルタープレートシステム、光学システムなどの主要コンポーネントで構成されます。 特定の波長の光で標本を励起して蛍光を発し、対物レンズと接眼レンズで増幅して標本の蛍光像を観察するものです。
