位相差顕微鏡の基本原理を理解したことがありますか?

Mar 18, 2023

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位相差顕微鏡の基本原理を理解したことがありますか?

 

位相差顕微鏡は、1935 年にオランダの科学者ゼルニケによって、染色されていない標本を観察するために発明されました。 生きた細胞や染色されていない生体標本の場合、細胞の各部分の微細構造の屈折率や厚さの違いにより、光波が通過すると波長や振幅は変化せず、位相(振幅差)のみが変化します。 )、人間の目には見えません。 観察。 位相差顕微鏡は、位相差を変化させ、光の回折や干渉現象を利用して位相差を振幅差に変えて生きた細胞や未染色標本を観察する顕微鏡です。 位相差顕微鏡と通常の顕微鏡の違いは、可変絞りの代わりに環状絞りを使用すること、通常の対物レンズの代わりに位相板付き対物レンズを使用すること、同軸度調整用の望遠鏡を備えていることです。


位相差顕微鏡法の基本原理:
物体の異なる構造成分の屈折率と厚さの違いを利用して、物体の各部を通過する光路差を振幅(光の強さ)の差に変換し、環状絞りと集光レンズを介して、位相板による位相差を対物レンズで実現した観察顕微鏡です。 主に生きた細胞や未染色の組織切片の観察に使用されますが、コントラストのない染色標本の観察にも使用されることがあります。


標本を通過した可視光の光路差が振幅差に変換されることで、各種構造間のコントラストが向上し、各種構造が鮮明に見えるようになります。 光は試料を通過すると屈折し、本来の光路から外れ、1/4λ(波長)だけ遅れます。 1/4λ増減すると光路差は1/2λとなり、光軸の後に2つのビームが干渉し、振幅を強めたり、増減させたりしてコントラストを向上させます。


位相差顕微鏡には、他の顕微鏡にはない 2 つの機能があります。 ① 直接光(視野内の背景光)と物体からの回折光を分離する。 ② 位相から波長の約半分が除去されるため、相互作用ができなくなり、強度が変化します。

 

4 Microscope

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