倒立顕微鏡と蛍光顕微鏡の選択の概要
顕微鏡は、細胞培養および関連する派生実験において重要な機器です。現在、さまざまなタイプの顕微鏡が市販されており、ニーズに合った適切な顕微鏡を選択するのは困難です。ここでは、倒立顕微鏡と蛍光顕微鏡の選び方をわかりやすくするための原理を紹介します。
倒立顕微鏡の構成は通常の顕微鏡と同じで、主に機械部、照明部、光学部の3つの部分から構成されます。倒立顕微鏡の構成は通常の正立顕微鏡と同じですが、対物レンズと照明系が逆になり、前者がステージの下に、後者がステージの上に配置されます。この構造により、照明集光系とステージ間の実効距離が大幅に長くなり、培養皿や細胞培養ボトル（もちろんスライドガラスも可）などの厚みのある観察器具の設置が容易になり、また、対物レンズと材料間の作動距離をそれほど大きくする必要がありません。倒立顕微鏡は、医療機関、保健機関、大学、研究機関で微生物、細胞、細菌、組織培養物、懸濁液、沈殿物などの観察に使用されています。培地中での細胞や細菌の繁殖・分裂の過程を連続的に観察し、その過程のあらゆる状態を捉えることができます。細胞学、寄生虫学、腫瘍学、免疫学、遺伝子工学、産業微生物学、植物学などの分野で広く使用されています。
蛍光顕微鏡は、細胞内の物質の吸収、輸送、分布、局在を研究するために使用されます。検査対象物に対して蛍光を発生させる方法には、UV照射後に直接蛍光を発する自然蛍光と、紫外線を照射して直接蛍光を発する方法があります。二次蛍光は、観察対象物を蛍光色素で処理し、紫外線を照射して蛍光を発することで発生します。クロロフィルなどの細胞内の一部の物質は、紫外線にさらされると自発蛍光を生成します。物質自体は蛍光を発しないものもありますが、蛍光色素や蛍光抗体で染色すると、紫外線が照射されると二次蛍光を発することがあります。蛍光顕微鏡は、高効率の点光源からカラーフィルターシステムを介して一定波長の光（紫外光365nmまたは紫青光420nm）を励起光として発し、標本内部の蛍光物質を励起してさまざまな色の蛍光を発し、対物レンズと接眼レンズで拡大して観察します。これにより、強いバックグラウンドでの弱い蛍光でも認識しやすく、感度も高くなります。主に細胞の構造、機能、化学組成の研究に使用されます。
