微生物顕微鏡直接計数法
実験手順（微生物顕微鏡直接計数法）
1. 希釈
醸造酵母懸濁液を適切に希釈してください。 菌液が濃縮されていない場合は、希釈する必要はありません。
2. 顕微鏡検査・計数室
サンプルを追加する前に、計数盤の計数室の顕微鏡検査を実行します。 汚れがある場合は、カウントする前に掃除する必要があります。
3. サンプルを追加する
清潔で乾燥した血球計数プレートをカバー ガラスで覆い、滅菌した口の細かいスポイトを使用して、カバー ガラスの端から希釈した酵母溶液を少量 (多すぎないように) 滴下します。 細菌溶液が毛細管透過によってギャップに沿って計数チャンバーに入るようにします。 一般に、計数チャンバーは細菌溶液で満たされます。 泡が発生しないように注意してください。
4. 顕微鏡による計数
5分間休んだ後、血球計数ボードを顕微鏡ステージに置き、最初に低倍率の顕微鏡を使用して計数室の位置を特定し、次に高倍率の顕微鏡に切り替えて計数します。 計数前に細菌溶液が濃すぎる、または薄すぎることが判明した場合は、計数する前に再度希釈を調整する必要があります。 一般的なサンプル希釈要件は、小細胞あたり約 5-10 個の細菌体が存在する必要があることです。 各計数室から計数のために 5 つのセル (オプションで 4 つの隅と中央のセル) を選択します。 グリッド線上にある菌糸体は、通常、上部と右側の線のみをカウントします。 酵母が発芽し、芽の大きさが母細胞の半分に達すると、2 つの細菌数が測定されます。 サンプルを計数するには、2 つの計数チャンバーから得られた値に基づいてサンプルの細菌含有量を計算する必要があります。
5. 血球計数ボードをきれいにします
使用後は、血球計数盤を水道の蛇口の水柱で洗い流してください。 硬いものを使用して洗わないでください。 洗濯後は自然乾燥させるか、ドライヤーで乾かしてください。 顕微鏡検査では、各小細胞内に細菌体やその他の沈殿物が残存しているかどうかを観察します。 汚れがひどい場合は、きれいになるまで繰り返し洗う必要があります。
