多光子レーザー走査顕微鏡の長所と短所

多光子レーザー走査顕微鏡の長所と短所

多光子レーザー走査顕微鏡法は、レーザー走査顕微鏡技術に基づく実験方法であり、3D 観察においてより高度な光学セクショニング機能を提供します。多光子蛍光励起法は、赤色または近赤外光の長波長を使用して、活性標本の破壊を最小限に抑えながら標本の高解像度の蛍光画像を取得するため、生きた細胞、特に脳切片、胚、全臓器、さらには生物全体の厚い生体組織の画像化に適しています。

利点は次のとおりです。

1、赤色光または赤外線励起の使用、光散乱は小さい(散乱の小さい粒子と波長の逆比の4乗)。

2、ピンホールを必要とせず、イメージング断面からより多くの散乱光子を収集できます。

3、ピンホールは焦点外領域または焦点領域から放出された散乱光子を区別できないため、深部イメージングにおける多光子の信号対雑音比は良好です。

4、単一光子励起は、ビームが焦点面に到達する前にサンプルに吸収され減衰しやすくなるため、深励起が容易ではありません。

5、生物顕微鏡観察では、*第一に考慮するのは、生物自体の活動状態を損なわず、水分、イオン濃度、酸素、栄養素の循環を維持することです。光観察の場合、熱エネルギーと光子エネルギーの両方が、照射量、光エネルギーに損傷を与えることなく細胞内に留まらなければなりません。

6、多光子顕微鏡にも多くの利点があります。3次元解像度、深度侵入、散乱効率、背景光、信号対雑音比、制御など、以前のレーザー顕微鏡にはない、または比類のない特性を持っています。

多光子共焦点レーザー走査顕微鏡は、さまざまな研究・応用分野に拡大され、サンプルを自然状態で3次元的に非破壊観察することができ、システムの解像度と信号対雑音比を向上させることができます。多光子励起後の材料特性の変化を利用して、3次元の高さのデータ保存や任意の方向への3次元微細加工も実現でき、高い応用価値を持っています。機械、材料、レーザー技術など、多光子共焦点顕微鏡に関連する技術のさらなる発展に伴い、多光子共焦点レーザー走査顕微鏡はさらに発展し、より広い用途に利用されると考えられます。

デメリットは以下のとおりです。

1、蛍光イメージングのみ。

2、サンプルに励起光を吸収できる色素が含まれている場合、 のような顔料、 標本、見本熱による損傷を受ける可能性があります。

3、解像度が若干低下、 それでも共焦点絞りを同時に使用することで改善できる。、 しかし信号が失われます。

4. 高価な超高速レーザーの制限により、多光子走査顕微鏡のコストが高くなります。