蛍光顕微鏡における各フィルターの役割
蛍光顕微鏡で最も重要な点はフィルターの組み合わせであり、励起フィルターと遮蔽フィルターの両方が観察される蛍光体に適しており、互いに適合している必要があります。特定の特定の目的では、フィルターの選択に誤りがあると、誤解が生じたり、誤った結果が生じたりする可能性があります。蛍光顕微鏡技術の成果と、高品質フィルターおよび独創的なフィルター群の使用は切り離すことができません。蛍光顕微鏡用のフィルターにはいくつかの種類があります。
1. 熱吸収フィルター
熱吸収フィルターは、光源スペクトル内の熱放射による光学素子群の損傷を防ぐために必要なフィルターです。初期の高度な顕微鏡には、熱吸収装置として蒸留水を入れることができるドラム型のボトルが装備されていました。最新の大規模研究用顕微鏡には、光源のライトボックスまたはチャンバー内に、透明でわずかに黄色のガラスシートであるガラス熱吸収フィルターが装備されています。 Leitz の KG1 (2 mm) および BG38 (4 mm) フィルターは、ほぼすべての紫外線および可視光スペクトルを透過でき、最大 98% の光束を備えたフィルターになります。赤外線光熱放射線のみを選択的に吸収します。
2. 励起フィルター
励起フィルターは長波長スペクトル線を選択的に吸収し、紫外光のみを透過します。紫、青、緑の光のフィルターは励起フィルターです。 Zeiss、Reichert、Olympus B シリーズ、G シリーズ、BG シリーズ、Shott UG シリーズ、Opton H、G、BP シリーズ、Leitz BP シリーズなどのフィルターはすべて励起フィルターです。
3. ブロッキングフィルター
ブロッキングフィルターは、短波長のスペクトル線と赤外線を選択的に吸収するフィルターで、角膜を紫外線損傷から保護しながら、観察者が検査対象物から発せられる蛍光を見ることができるようにします。
4. 色光分離フィルター
色光分離フィルターは、励起光を被検物に反射させて蛍光を発させ、その蛍光を接眼レンズに透過させるフィルターです。このタイプのフィルターは落射ビーム集光器でのみ使用できますが、透過型蛍光顕微鏡では色分離は必要ありません。
5. 干渉フィルター
干渉フィルターは高性能励起フィルターの一種です。研磨された2枚のガラスの間に数枚の薄い金属膜を重ねて作られたフィルターです。各金属薄膜の屈折率は異なるため、照明光源の異なる波長のスペクトル線が各金属膜で繰り返し反射され、スペクトル線の一部の波長は弱め合う干渉によって打ち消し合い、他の波長は干渉によって強化されます。付加的な干渉が発生し、透過されます。これにより、透過スペクトルが狭く、半値幅がわずか6～20nm、透過率が60%～70%のフィルターが得られます。
