蛍光顕微鏡の特殊な構造コンポーネントとは何ですか?
カラーフィルターブロックは蛍光顕微鏡の重要な部分であり、その中核となる部品は励起光用の第1バリアフィルター、発光光用の第2バリアフィルター、光束分割ミラーで構成されています。さまざまなメーカーのカラー フィルターのモデルと名前が一致していないことがよくあります。
1. 励起光フィルターと発光フィルター:光源と蛍光色素の特性に基づいて、特定の波長範囲の励起光を提供し、サンプルによって励起された蛍光を通過して接眼レンズに到達させて撮像するために、通常は次の 3 種類のマッチングが選択されます。
UV 励起: 励起光フィルターは、UV 光を通過させ、400nm を超える可視光の通過をブロックします。対応する発光フィルターは青色光を通過させ、DAPI 染色に適用した場合などに視野内の光が青色に見えます。
青色光励起: 励起光フィルターは青色光を通過させ、他の波長からの光を遮断します。対応する発光フィルターは、GFP 染色マーカーなどの緑色光を通過させます。
緑色光励起: 励起光フィルターは緑色光を通過させ、他の波長からの光をブロックします。対応する発光フィルターは通常、ローダミン染色などの赤色光を通過させます。
2. 半透明半反射カラーフィルター: その機能は、励起光の通過と反射を完全にブロックすることです。そして、対応する波長範囲内の光を放射します。励起光フィルターと発光光フィルターに対応したモデルです。
(2) 対物レンズと接眼レンズ
対物レンズにはさまざまな種類がありますが、自家蛍光が極めて少なく、光の透過性能(波長域)が蛍光に適しているため、スケールや色収差の低減を重視したレンズを選ぶのがベストです。顕微鏡視野内の画像の蛍光の明るさは、対物レンズの開口率の二乗に正比例し、倍率に反比例するため、蛍光画像の明るさを向上させるには、より大きな開口率の対物レンズを使用する必要があります。特に蛍光が不十分な標本の場合は、開口率が高く光の透過率が高い対物レンズを使用し、できるだけ倍率の低い接眼レンズを使用する必要があります。
(3) その他の光学デバイス
アルミニウムは青紫領域の紫外線と可視光の吸収が少なく、90% 以上を反射するため、鏡の反射層は通常アルミニウムでコーティングされます (銀の反射率はわずか 70%)。一般的には平面鏡が使用されます。蛍光顕微鏡用に特別に設計および製造された集束レンズは、紫外光を透過する石英ガラスまたはその他のガラスでできています。落光装置は、透過光源の機能に加えて、厚いプレート、フィルター膜、細菌コロニー、組織培養物、その他のサンプルなどの不透明および半透明の標本を直接観察するのにより適しています。近年、落射蛍光顕微鏡として知られる落射光装置を使用した多くの新しいタイプの蛍光顕微鏡が開発されています。
(4) 光源
現在では、50 W または 100 W の高圧水銀ランプが光源として一般的に使用されています。{0}動作中、2 つの電極間で放電が発生し、水銀が蒸発し、球内の圧力が急速に上昇します (このプロセスには通常約 5 ~ 15 分かかります)。このプロセス中に光量子が放出され、放出された光の波長はさまざまな蛍光物質を励起するのに十分です。したがって、蛍光顕微鏡で広く使用されています。
水銀ランプの寿命は比較的短く、通常は 200 時間です。この寿命の制限に対応して、近年、2000 時間の超長寿命とフレキシブルな使用法を備えた新型蛍光光源 X-Cite が広く使用されています-。予熱不要ですぐに使用できます。
