レーザー共焦点顕微鏡の動作原理
レーザー共焦点顕微鏡の動作原理
オリンパスのレーザー共焦点顕微鏡は信号を取得できる検出器です。 その動作原理は、点光源が蛍光顕微鏡を通過した後、「エアリーディスク」と呼ばれる拡大されたスポットとして画像化されることです。 標準的な白色光干渉共焦点顕微鏡では、焦点面の外側に放射される光はピンホールによってブロックされ、そのサイズによってエアリー ディスクが検出器にどれだけ入ることができるかが決まります。 ピンホールが小さいほど、得られる画像は鮮明になりますが、光の大部分が失われるため、画像は暗くなります。 絞りピンホールが小さいほど解像度は向上しますが、やはり、より多くの光信号が失われます。 オリンパスのレーザー共焦点顕微鏡は、カラーCCD画像とレーザー走査型共焦点画像を同時に取得できます。 オリンパスの共焦点レーザー顕微鏡は、1 つの光源、1 つのサンプル、1 つの検出器の共焦点セットアップを通じて高さ測定が可能です。 サンプルが対物レンズの焦点面に配置され、サンプル表面から反射されたレーザー光が共焦点開口部に焦点を結ぶと、光検出器はサンプルからの信号を受信します。 サンプルが焦点の合っていない位置にある場合、共焦点絞りはレーザー信号を受信しないため、焦点の合った信号のみが収集されます。 この機能により、オリンパスレーザー共焦点顕微鏡の光学セクショニング機能を実現できます。
共焦点レーザー顕微鏡の利点
1. 光源としてレーザー光を使用し、対応する蛍光プローブをマークした後、サンプルを点ごとに走査して、二次元の光学的断面画像を層ごとに取得します。 「細胞CT」の機能を備えており、コンピュータの三次元再構成ソフトウェアによってサポートされて三次元画像を取得でき、画像を任意の角度で回転させて細胞や組織の三次元形状と空間関係を観察できます。
2. 生きた細胞や組織を損傷なく観察でき、細胞内のCaイオン濃度やpH値などの生きた細胞の生理情報を動的に測定できます。
3. 細胞膜の流動性、細胞間コミュニケーション、細胞融合、細胞骨格の弾性などを測定でき、細胞内の「手術」を完了するための「光のナイフ」として使用できます。 この技術により、生きた細胞や組織をその場で動的かつ定量的に観察・計測することが可能になります。
