顕微鏡に一般的に適用される 2 つの観察アプローチ
1、暗視野観察
暗視野は、実際には暗視野照明です。 照明光を直接観察するのではなく、検査対象物の反射光や回折光を観察するため、明視野とは特性が異なります。 そのため、視野は背景が暗くなり、検査対象物は明るい像を示します。
暗視野の原理は、光学的なチンダル現象に基づいており、強い光にさらされると、強い光による回折により塵の粒子が人間の目で観察できなくなります。光が斜めに投影されると、光の反射により粒子の体積が増加して見えるため、人間の目に見えるようになります。
暗視野観察に必要な専用アクセサリーが暗視野スポットライトです。 特徴は、光線を対象物の下から上に通過させず、照明光が対物レンズに直接入射しないように光の経路を変更し、対象物表面での反射光や回折光による明るい像を利用することです。 暗視野観察の分解能は明視野観察に比べてはるかに高く、最大300万円に達します。 0.02~0.004
2、位相差ミラーの検査方法
光学顕微鏡の開発における位相差顕微鏡の発明の成功は、現代の顕微鏡技術における重要な成果です。人間の目は光波の波長(色)と振幅(明るさ)しか区別できないことがわかっています。無色透明の生体標本の場合、光を透過しても波長や振幅があまり変化しないため、明視野で観察することが困難です。
位相差顕微鏡は、鏡検査において検査対象物の光路長の違いを利用し、光の干渉現象を有効に利用して、人間の目では識別できない位相差を識別可能な振幅差に変換する顕微鏡です。無色透明の物質もはっきりと見えるため、生きた細胞の観察が非常に容易になるため、倒立顕微鏡では位相差顕微鏡が広く使われています。
位相差顕微鏡の基本原理は、標本を通過する可視光の光路差を振幅差に変換することで、さまざまな構造間のコントラストを向上させ、鮮明に見えるようにすることです。標本を通過した光は屈折を受け、元の光路から外れて1/4 λ(波長)だけ遅れます。光路差がさらに 1/4 λ 増減すると、光路差は 1/2 λ になり、軸を合わせた後の 2 つの光束間の干渉が増減してコントラストが向上します。 構造の点で、位相差顕微鏡は通常の光学顕微鏡と 2 つの特別な違いがあります。
1. 環状絞りは光源とコンデンサーの間にあり、その機能はコンデンサーを通過して標本に焦点を合わせる中空の光円錐を形成することです。
2. 角度位相板: フッ化マグネシウムでコーティングされた位相板が対物レンズに追加され、直接光または回折光の位相を 1/4 λ 遅らせることができます。それは次の 2 つのタイプに分類できます。
(1) 。 A+位相板:直接光を1/4 λ遅らせ、2組の光波を軸を合成して加算します。振幅が増加し、試料構造が周囲の媒体よりも明るくなり、明るいコントラスト(または負のコントラスト)が形成されます。
(2) 。 B+位相板: 回折光を 1/4 λ 遅らせ、2 組の光線の軸を結合した後に光波を減算します。その結果、振幅が減少し、暗いコントラスト (または正のコントラスト) が形成されます。構造は周囲の媒体よりも暗くなります
